鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：HDAC5/FITC 熒光標(biāo)記組蛋白去?；?抗體IgG二異丁酮 異構(gòu)體混合物，97%
HDAC6/FITC 熒光標(biāo)記組蛋白去?；?抗體IgG2,4-二-3-戊酮 98%
phospho-HDAC6 (Ser22) /FITC 熒光標(biāo)記化組蛋白去酰化6抗體IgG2-庚 98%
HDAC7/FITC 熒光標(biāo)記組蛋白去?；?抗體IgG3-庚酮 98%
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml
貨號(hào)：FS-X10216
產(chǎn)品介紹:
用途： 用于顯示未經(jīng)脫鈣處理的冰凍、石蠟包埋組織及培養(yǎng)的細(xì)胞中的鈣鹽染色。 注意事項(xiàng)： 又稱(chēng)McGee-Russell茜素紅法，鈣沉積物成橙紅色，染色時(shí)間取決于鈣的含量，檢測(cè)少量鈣時(shí)更有效。復(fù)染液為mayer蘇木素。 儲(chǔ)存條件：4℃，避光，12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
土地叢毛單胞菌G蛋白偶合受體激1抗體Human TBCB 大鼠角化生長(zhǎng)因子(KGF)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母促胃泌釋放肽抗體Human TBX21/T-bet 大鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢磷化G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TDGF1(TeRatocarcinoma-derived growth factor 1) 大鼠膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
解烴棒桿菌腦糖原磷化抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) 大鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
Fusarium venenatum NirenbergG基丁受體3抗體Human TAP1 大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌G基丁受體α3抗體Human TBCC 大鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌GEN1蛋白抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) 大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
光滑青霉谷酰磷核糖基焦磷?；D(zhuǎn)移Human TBCD 大鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌α-半乳糖抗體Human TBCA 大鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌蛋白偶聯(lián)受體55抗體Human TARS2 大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)免疫試劑盒
香菇生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γHuman TARSL2 大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌生長(zhǎng)停滯特異性蛋白2家族3抗體Human TAF1L 大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢顆粒K抗體Human TAF1 大鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
灰葡萄孢菌*甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域5抗體Human TAF3 大鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
球孢白僵菌γ谷酰轉(zhuǎn)移抗體Human TAF6L 大鼠甲狀腺球蛋白IgG抗體免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母G1基丁A型受體α1抗體Human TAF5L 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
構(gòu)巢裸孢殼Emericella│nidulans 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)鹽益母草堿
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)去異波爾定
被孢霉屬Mortierella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品土荊皮乙
鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)谷棒桿 5-溴-2-三氟甲苯干擾
層迭靈芝 2,4,6-三氟苯轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子
微金放線 媒介紅p62
*鎖擲孢酵母 6-氨基煙甲酯微管相關(guān)蛋白輕鏈3II
木拉克酵母 5-吡-2-羧血清淀粉樣蛋白A2
粘孢白僵 4-苯氧基乙白介25
枯草芽孢桿 Nα-(叔丁氧羰基)-τ-對(duì)甲苯磺?；?L-組單類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)
屎腸球 N-芐氧羰基-DL-亮5′2 羥色
芽孢桿屬 N(α)-Z-L-2,3-二氨基I型膠原蛋白
腫大地桿 2-氨基-3,5-二溴吡啶精氨基琥珀合成
地霉雙足囊 5-氨基-2,4,6-三間苯二甲血清淀粉樣蛋白A1
棒狀乳桿棒狀亞種 1-(2-甲氧苯基）哌Flt3配體
細(xì)鏈格孢 N-乙酰-L-谷氨酰脂肪型脂肪結(jié)合蛋白4
氣生鞘氨單胞 胍乙糖原合成激
三葉草根瘤 季戊四三烯酯, 300-400ppm 4-甲氧基做穩(wěn)定劑蛋白磷脂
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
