細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年女性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
AKT3 Others Human 人 AKT3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SMCFectagen? 平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒
LoVo細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 HEK293,人胚腎上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
家兔腎細(xì)胞;RABK3
SFRP4 Others Mouse 小鼠 sFRP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MCF-7/Adr 腺癌/*耐藥株
CL-0099HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 )
小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49) 大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
貓腎細(xì)胞;CRFK
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
AKT3 Others Human 人 AKT3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SMCFectagen? 平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒
LoVo細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 HEK293,人胚腎上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
家兔腎細(xì)胞;RABK3
SFRP4 Others Mouse 小鼠 sFRP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Anti-phospho-PAK1(pSer)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化p21激活激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Streptavidin/Gold 金標(biāo)記鏈霉親和素(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
FOSL2抗體 Anti-FOSL2 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
FN3K 英文名稱: 果糖胺-3激酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 規(guī)格 0.1ml
Streptavidin/Gold 金標(biāo)記鏈霉親和素(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SERPINF2 SerpinF2 兔單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser129) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml
淋巴細(xì)胞分離液(小鼠、大鼠、豬、兔等) 250ml
zbtb11 英文名稱: 鋅指蛋白913抗體 0.2ml
Dab1 英文名稱: 磷脂蛋白受體Dab1抗體 0.1ml
SERPINF2 SerpinF2 兔單抗 (PE) Human
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM品牌phospho-CK II beta (Ser209) 英文名稱: 磷酸化絲酸/蘇酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體 0.1ml
Epac2 英文名稱: *核苷酸交換因子4 0.2ml
ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 Anti-ABCB5/ 0.1ml
Anti-WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt9a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1 (Ser319) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 規(guī)格 0.1ml
factor V(Vcoagulation factor) *5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg