EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于一Y染色體微缺失男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
IL17RC Others Human 人 IL17RC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0079ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CNE人鼻咽癌細(xì)胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS
CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤)
K562/Adr 人白血病*耐藥株
CL-0107HGC-27(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
12. 骨骼細(xì)胞系統(tǒng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4
IL10 Others Human 人 IL10 / Interleukin-10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0079ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IL17RC Others Human 人 IL17RC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CNE人鼻咽癌細(xì)胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS
CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤)
Anti-P2Y1 receptor/FITC 熒光素標(biāo)記P2Y1受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Streptavidin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
*激酶2抗體 Anti-CK2 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591) 英文名稱: 磷酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml
Rhesus antibody Rh PIWIL1/Miwi piwi樣1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Streptavidin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
GRM2/GLUR2 (Glutamate Receptor Metabotropic 2) 促代謝型*受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
RHOA RhoA 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-Crkl (Tyr207) 磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 規(guī)格 0.1ml
BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒 200次 自產(chǎn)
ZBTB3 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB3抗體 0.2ml
DCTN1 英文名稱: 動(dòng)力蛋白激活蛋白1抗體 0.1ml
RHOA RhoA 兔單抗 (FITC) Human
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901圖片SRRM3 英文名稱: 絲酸/精酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 0.2ml
ENT2 英文名稱: 核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ENT2抗體 0.2ml
ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 Anti-ABCB6 0.1ml
Anti-WNT10A/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路WNT10A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 規(guī)格 0.1ml
Collagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。