细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T免费代测注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
细菌蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T免费代测实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
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大鼠肾小管上皮细胞*培养基 100mL
SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人细胞裂解液 (阳性对照)
RH-35大鼠肝癌细胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培养基+10%FBS
食管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
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豹猫肺成纤维样细胞;LCL1
CNPY2 Others Human 人 CNPY2 人细胞裂解液 (阳性对照)
脑静脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
BJAB细胞，人B细胞淋巴瘤细胞系 KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株,B22细胞 人前列腺成纤维细胞裂解物HPrFL
NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
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人真皮微血管内皮细胞-HDMEC
犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR
95-D细胞，人高转移肺癌细胞 转血小板基因仓鼠卵巢细胞,CHO-pt细胞 CM-M018小鼠颌下腺上皮细胞*培养基100mL
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Humanmicrotransferrinuria,MTFELISA试剂盒人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
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