細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD1B Others Human 人 CD1B / CD1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S
視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎小管上皮細(xì)胞MREpiC
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20
CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
HME4細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 青春雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0905
UACC-812(人導(dǎo)管瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HuH-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928
HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHDMEC cDNA
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22
ZR-75-30細(xì)胞,癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒 Human neuregulin-4,NRG4 ELISA kit
MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISA試劑盒人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human transforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterleukin10,IL-10ELISA試劑盒人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織抗壞血酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T使用說明書大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TNF-B酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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