我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

大鼠表皮黑色素細(xì)胞【Rat Skin: Normal Melanocytes】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAP 96T/48T Z-Ala-Ala-Leu-pNA  Z-Ala-Ala-Leu-pNA  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 ，英文名： PAP ELISA Kit 三亞碳酸酯  TMC   質(zhì)量規(guī)格： 度≥99%

小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit 碳酸錳(>98%,BR)  Manganese (II) carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 二氫錳(>98%,BR)  Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor,PAI 96T/48T 松三糖單水；D-(+)-松三糖一水  Melezitose monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1 96T/48T 縮節(jié)胺(植物激素級(jí))  Mepiquat chloride  質(zhì)量規(guī)格：>97%,植物激素級(jí)

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI1 ELISA Kit 偏(>38%(HPO3),BR)  Metaphosphoric acid  質(zhì)量規(guī)格：>38%(HPO3),BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit 肉桂酸甲酯(>98%,BR)  Methyl cinnamate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI2 ELISA Kit 二氫酮酸甲酯(植物激素級(jí))  Methyl dihydrojasmonate  質(zhì)量規(guī)格：>90%,植物激素級(jí)

小鼠纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒 ，英文名： TAFI ELISA Kit 吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)  Methyl indole-4-carboxylate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
COLLAGENI蛋白共沉淀分析試劑盒5 醋酸鎂四水(分子生物學(xué)級(jí))  Magnesium acetate, tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二氫鈉一水(ACS級(jí))   phosphate, monobasic, monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：ACS級(jí),>98.5%

小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)ELISA試劑盒 ，英文名： F8aLC ELISA Kit 葡萄糖酸鈣  Calcium gluconate, hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T 十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?；溠刻擒?/span>  N-Dodecyl-b-maltoside  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 Human LRP ELISA Kit 鹽酸氨基脲  Aminourea   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫酸鏈霉素滅菌溶液，30 mg/ml  Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml  質(zhì)量規(guī)格：Sterile滅菌溶液,30mg/ml

Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20 乙酰胺  Acetamide  質(zhì)量規(guī)格：>98%

MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 萘乙酰胺(AR)  1-Naphthylacetamide  質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%

小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅫ ELISA Kit 鐵屑(>98%，BC)  Iron granules  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BC

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 96T/48T 檸檬酸鐵(>98%，BR)  Iron(III)   質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
大鼠表皮黑色素細(xì)胞價(jià)格動(dòng)物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20 三戊酯(>98.0%(GC))  Triamyl Phosphate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

動(dòng)物腦組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀三水(>98%,BC)  Potassium phosphate, tribasic trihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

動(dòng)物內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀  Potassium phosphate, tribasic  質(zhì)量規(guī)格：>98%

動(dòng)物皮膚組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trimethyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

動(dòng)物脾臟組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鈣(>98%,BR)  Calcium phosphate, tribasic  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

動(dòng)物前列腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

動(dòng)物全血高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10 三丁酯(standard for GC,>99.5%)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5%

動(dòng)物全血活性線粒體分離試劑盒10 三丁酯(CP)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：CP

動(dòng)物全血線粒體粗提分離試劑盒10 三丁酯(AR,99%)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：AR,99%

動(dòng)物全組織糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒10 三苯酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Triphenyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。