注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963918 |
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞【Rat Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
化妝品糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20 天青C(>50%,BS) Azure C 質量規(guī)格:>50%,BS
化妝品糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒20 硫酸鋇(>98%,BR) Barium sulfate 質量規(guī)格:>98%,BR
化妝品糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20 苯磺酸(>98%,BR) Benzenesulfonic acid 質量規(guī)格:>98%,BR
化妝品糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測試劑盒20 安息香(>98%,BR) Benzoin 質量規(guī)格:>98%,BR
化妝品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20 二苯甲酮腙(>98%,BR) Benzophenone hydrazone 質量規(guī)格:>98%,BR
化妝品乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20 氯化鉍(>98%,BR) Bismuth (III) chloride 質量規(guī)格:>98%,BR
環(huán)境副傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20 檸檬酸鉍 Bismuth (III) 質量規(guī)格:BR
環(huán)境副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定性試劑盒20 化鉍鉀 Bismuth (III) potassium iodide 質量規(guī)格:BR
環(huán)境鈣離子濃度比色法定量檢測試劑盒20 硫酸鉍(>98%,BR) Bismuth (III) sulfate 質量規(guī)格:>98%,BR
環(huán)境鈣離子濃度比色法定量檢測試劑盒20 堿式碳酸鉍 Bismuth(III) subcarbonate basic 質量規(guī)格:BR
CHROMOMYCINA3細胞核形態(tài)染色試劑盒50 氯化銫 Cesium chloride 質量規(guī)格:>99%,分子生物學級
MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氫二鈉七水 phosphate, dibasic, heptahydrate 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 dATP溶液(100 mM) dATP 100 mM solution 質量規(guī)格:>97%,BR
Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 癸酸鈉 decanoate 質量規(guī)格:>99%,進分
Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 瓊脂糖(美侖電泳級) Agarose 質量規(guī)格:美侖,電泳級
Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA試劑盒人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瓊脂糖(Sigma) Agarose 質量規(guī)格:Sigma原裝
真菌/酵母細胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20 植物血凝素 Phytohemagglutinin 質量規(guī)格:BR
MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 6-糠基氨基嘌呤,激動素 Kinetin,6-Furfurylaminopurine 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠蘋果酸脫氫酶(MDH)ELISA試劑盒 ,英文名: MDH ELISA Kit 乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸 EGTA, egtazic acid 質量規(guī)格:>98%,分子生物學級
小鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T 無水二氫鈉(分子生物學級) phosphate, monobasic, anhydrous 質量規(guī)格:>98.5%,分子生物學級
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞價格大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA檢測試劑盒Rathiston-H2bELISAKit 96T/48T 硫酸奎寧水合物(>98%,BR) Quinine hemisulfate salt hydrate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒RatCathepsinK,cath-KELISAKit 96T/48T 硫酸卡那霉素(標準品) Kanamycin mono sulfate 質量規(guī)格:效價測定
大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA檢測試劑盒RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit 96T/48T 硫酸卡那霉素 Kanamycin sulfate 質量規(guī)格:美國進口
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測試劑盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T 硫酸卡那霉素 Kanamycin mono sulfate 質量規(guī)格:效價≥750IU/MG,BP,BR
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T 硫酸卷曲霉素(標準品) Capreomycin Sulfate 質量規(guī)格:效價測定
大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測試劑盒RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T 硫酸卷曲霉素 Capreomycin Sulfate 質量規(guī)格:含量≥700IU/mg,BR
大蒜*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 硫酸肼(標準品) Hydrazine sulfate 質量規(guī)格:供檢查用
大巖筒(gloxinia)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 硫酸肼(標準品) Hydrazine sulfate 質量規(guī)格:供TLC法系統(tǒng)適用性試驗用
單胺氧化酶系列高通量篩選熒光檢測試劑盒500 硫酸金雀花堿;硫酸司巴丁(標準品) Sparteine sulfate 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
單核白細胞/細胞分離試劑盒10 硫酸金雀花堿 HPLC≥98% 20mg