細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠皮下脂肪細胞說明 | T25m2 | CS-963927 |
大鼠皮下脂肪細胞【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
動物組織β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量檢測試劑盒20 乙酸鈣一水(>98%,BR) Calcium acetate, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物組織β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20 三鈣(>98%,BR) Calcium phosphate, tribasic 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物組織冰凍切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 DL-硒代蛋氨酸(USP) DL-Selenomine 質(zhì)量規(guī)格:>98%(HPLC),USP
動物組織超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50 蜜二糖 Melibiose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物
動物組織鈣ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 草酸鈉(>98%,BC) oxalate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
動物組織鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 鎢酸鈉二水(>98%,BR) tungstate, dehydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物組織高內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10 丁二酸酐(>98%,BR) Succinic anhydride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物組織高質(zhì)化肌質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10 吐溫60 Tween-60 質(zhì)量規(guī)格:BR
動物組織活性肌質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10 酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC) Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BC
動物組織活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10 硫酸鈣(>99%,BR) Calcium sulfate, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
動物組織氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 硫酸軟骨素 Chondroitin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
ELISAKitADR兔阿霉素規(guī)格:48T/96T 異煙酸 Isonicotinic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 ,英文名: BSA ELISA Kit L-蘋果酸 L-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人褪黑素(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMelatonin,MTELISAKit 96T/48T 蛋白酶K溶液(20 mg/ml) Proteinase K Solution, 20 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格:20 mg/ml
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)試劑盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit 多聚賴氨酸0.1%溶液 Poly-L-lysine solution ( 0.1%) 質(zhì)量規(guī)格:M.W:150,000~300,000
英文名稱HumanE-CadherinELISAKit人E-鈣粘附分子(E-Cadherin)規(guī)格:96T/48T 鹽酸四環(huán)素溶液,50 mg/ml Tetracycline solution, 50 mg/ml, sterile 質(zhì)量規(guī)格:50 mg/ml,滅菌裝
動物組織總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 D-葡糖糖-6-二鈉二水 D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ELISAKitAβ1-40兔β淀粉樣蛋白1-40規(guī)格:48T/96T 丁二酸鈉(AR) succinate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 牛血紅蛋白 Hemoglobin 質(zhì)量規(guī)格:BR
Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒 聚乙二醇10000 PEG 10000 質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000
大鼠皮下脂肪細胞說明地生蘭(terresial)移植維護培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 靈芝酸C甲酯 HPLC≥95% 20mg
地生蘭(terresial)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 靈芝酸C HPLC≥98% 10mg
電擊法酵母細胞轉(zhuǎn)化試劑盒20 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電擊法細胞融合試劑盒10 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電鏡檢測化學固著溶液10毫升 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升 靈芝酸B HPLC≥98% 20mg
電鏡組織三固著液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升 靈芝酸B HPLC≥97% 20mg
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌制備試劑盒1 靈芝酸AM HPLC≥98% 20mg
電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒5 靈芝酸A(標準品) Ganoderic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
吊鐘海棠*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 靈芝酸A HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。