大鼠角膜上皮細(xì)胞【Rat Eye: Normal Corneal Epithelial Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
英文名稱MouseIL-1sRⅠ小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 9-(2',3',5'-三-氧基-苯-β-D-阿糖)腺嘌呤  9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格：96T/48T 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽  EHNA   質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格：96T/48T 2-氟腺嘌呤  2-Fluoroadenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseIL-1β小鼠白介素1β(IL-1β)規(guī)格：96T/48T 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseIL-2sRα小鼠白介素2可溶性受體α鏈(CD25)(IL-2sRα)規(guī)格：96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate  salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseIL-2sRβ小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)規(guī)格：96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽  Nicotinic acid adenine dinucleotide  salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱Mouseinducibleniicoxidesyhase小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)規(guī)格：96T/48T α-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸  α-Nicotinamide adenine dinucleotide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseInhibinA小鼠抑制素A(INHA)規(guī)格：96T/48T NAD+, 鋰鹽  NAD+, Lithium Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseinhibinB小鼠抑制素B(INHB0規(guī)格：96T/48T 9--d3-腺嘌呤  9-Methyl-d3 Adenine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱MouseInsulieceptorβ(ISR-β)小鼠胰島素受體β(ISR-β)規(guī)格：96T/48T β-煙酰胺腺嘌呤二核苷, 縮減環(huán)已基銨鹽  β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
小鼠嘌呤核苷酸0酸化酶(PNP)ELISA試劑盒 ，英文名： PNP ELISA Kit 甲酰胺  Formamide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

小鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T 聚乙二醇8000  PEG 8000  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

人分泌成分(SC)試劑盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit 氯化鋰(分子生物學(xué)級(jí))  Lithium chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%

RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫酸亞鐵銨六水  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Chu’sN6*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 紅四氮唑  TTC,TTZ,Tetrazolium Red  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 磺胺甲氧噠嗪  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA試劑盒 ，英文名： CO ELISA Kit 磺胺甲氧噠嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulfamethoxypyridazine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測(cè)試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽  TCEP;   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit 硫代硫酸鈉五水(AR)   thiosulfate, pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

RatLaminin,LNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 化鈉(AR)   iodide  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR
大鼠角膜上皮細(xì)胞操作蛋白飽和溶液1毫升 硫酸博萊霉素/博來(lái)霉素/爭(zhēng)光霉素  Bleomycin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量1.5~2.0U/mg,BR

蛋白變性液10毫升 硫酸鉍(>98%,BR)  Bismuth (III) sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

蛋白表位標(biāo)記技術(shù)試劑盒5 硫酸鋇(>98%,BR)  Barium sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

蛋白儲(chǔ)存液10毫升 硫酸巴龍霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Paromomycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

蛋白電泳10倍濃縮運(yùn)行緩沖液500毫升 硫酸巴龍霉素  Paromomycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28

蛋白電泳2倍樣品處理液10毫升 硫酸銨鋁十二水(>98%,BR)  Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

蛋白電泳SYPRO橙色染色試劑盒10 硫酸銨  Ammonium sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

蛋白電泳固綠染色試劑盒10 硫酸氨基葡萄糖（標(biāo)準(zhǔn)品）  Glucosamine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

蛋白電泳麗春紅染色試劑盒10 硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg

蛋白電泳尼羅紅染色試劑盒20 硫酸安普霉素，硫酸阿布拉霉素  Apramycin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>500U/mg,BR
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。