大鼠食管上皮細胞【Rat Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cells】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠食管上皮細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963875 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
英文名稱HumanPlasminogenactivator,urokinasereceptor人尿激酶型血漿酶原激活因子受體((PLAUR,uPAR))規(guī)格:96T/48T 咪康唑 Miconazole 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPlatelet-DerivedGrowthFactor人血小板源性生長因子(PDGF-AB)規(guī)格:96T/48T 麥迪霉素 Midecamycin 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptor,PDGFsRα人血小板源性生長因子可溶性受體α(PDGFsRα)規(guī)格:96T/48T 米諾地爾葡萄糖苷酸 Minoxidil Glucuronide 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPlateletFactor4人血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 嗎替麥考酚酯-d4 Mycophenolate Mofetil-d4 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPPAR-γ人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)規(guī)格:96T/48T 麥考酚酯(環(huán)氧樹脂雜質E) Methyl Mycophenolate (EP Impurity E) 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱Humanpregnancyassociatedplasmaprotein-A人相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 嗎替麥考酚酯N-氧基(環(huán)氧樹脂雜質G) Mycophenolate Mofetil N-Oxide (EP Impurity G) 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPro-ANP(1-98)人心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格:96T/48T 奈替米星 Netilmicin 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanProgesterone人孕激素(Progesterone)規(guī)格:96T/48T 制霉菌素 Nystatin 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanProinsulin人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奧氮平內酰胺雜質 Olanzapine Lactam Impurity 質量規(guī)格:美國進口
英文名稱HumanPSA人前列腺特異性抗原(PSA)規(guī)格:96T/48T 奧氮平硫代內酰胺雜質 Olanzapine Thiolactam Impurity 質量規(guī)格:美國進口
小鼠染色質裝配因子1亞基B(CHAF1B)ELISA試劑盒 ,英文名: CHAF1B ELISA Kit 馬來酸曲美布汀(標準品) Trimebutine maleate 質量規(guī)格:含量測定
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 96T/48T 肝素鈉/肝磷脂鈉鹽 Heparin 質量規(guī)格:細胞培養(yǎng)級,效價≥180IU/mg
大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)試劑盒 Rat Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit -β-環(huán)糊精 HE-β-CD 質量規(guī)格:BR,>98%,藥用級
英文名稱HumanIL-11ELISAKit人白介素-11(IL-11)規(guī)格:96T/48T 奈福泮/鹽酸平痛新 Nefopam HCl 質量規(guī)格:>99%,CP
動物直腸組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 甲氨蝶呤二鈉鹽 Methotrexate di 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲氨蝶呤二鈉鹽 (標準品) Methotrexate di 質量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
小鼠染色質域解旋酶DNA結合蛋白4(CHD4)ELISA試劑盒 ,英文名: CHD4 ELISA Kit 鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星 Sarafloxacin HCl 質量規(guī)格:>97%,BR
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T 鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標準品) Sarafloxacin HCl 質量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
大鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒 Rat Cyclin Depende Kinase 5,CDK5 ELISA Kit 甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽 Diphemanil mesylate 質量規(guī)格:>98%
英文名稱HumanIL-10ELISAKIT人白介素10(IL-10)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T 甲硫二苯馬尼(標準品) Diphemanil mesylate 質量規(guī)格:>98%,標準品
大鼠食管上皮細胞說明大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)試劑盒 Rat Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11/ECF ELISA Kit 馬桑寧內酯 HPLC≥98% 5mg
大鼠嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPO)試劑盒 Rat Eosinophil Peroxidase,EPO ELISA Kit 馬賽替尼 Masitinib 質量規(guī)格:>98%
大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 馬錢苷酸(標準品) Loganic acid 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠瘦素(LEP)試劑盒 Rat Leptin,LEP ELISA kit 馬錢苷酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠雙氫(DHT)ELISA檢測試劑盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T 馬錢苷(標準品) Loganin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠雙氫(DHT)試劑盒 Rat Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 馬錢苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T 馬尿酸鈉(>98%,BR) hippurate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit 馬尿酸 Hippuric acid 質量規(guī)格:>98%
大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T 馬來(>98%,植物激素級) MH, maleic hydrazide 質量規(guī)格:>98%,植物激素級
大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 馬來酸依那普利(標準品) Enalapril Maleate 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。