注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠小腸平滑肌細胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963873 |
大鼠小腸平滑肌細胞【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PorcineProgesterone,PROGELISA試劑盒豬孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甾,,(),四烯酮 HPLC≥98% 5mg
PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甾,()二烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg
PorcineRelaxin,RLNELISA試劑盒豬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 麥珠子酸 HPLC≥98% 5mg
Porcine-glucosecoanspoer1,GSLT1ELISA試劑盒豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(GSLT1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 貓尾草異黃酮 HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑盒豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 貓眼草酚 D HPLC≥98% 5mg
PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛萼晶乙 HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA試劑盒豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛萼乙素 HPLC≥98% 5mg
Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛果香茶菜醛 A HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleVascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISA試劑盒豬可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛喉帖 G HPLC≥98% 5mg
PorcineSomatostatin,SSELISA試劑盒豬生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 毛喉帖 J HPLC≥98% 5mg
動物脂肪組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%
RatvonWillebrandFactor,vWFELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 皮質(zhì)甾酮(標準品) Corticosterone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.0%,標準品
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 ,英文名: Hsp-40 ELISA Kit 二硫化四乙基秋蘭姆 Disulfiram 質(zhì)量規(guī)格:>97%
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA檢測試劑盒MouseprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T 雙硫侖(標準品) Disulfiram 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)試劑盒 Human calnexin ELISA Kit 楊梅素/楊梅酮 Myricetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95.0%,BR
RatIerferonγ,IFN-γELISAKit大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 楊梅素/楊梅酮(標準品) Myricetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
PASE-1蛋白共沉淀分析試劑盒5 去氧膽酸 Deoxycholic acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%
Mouselipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T β-環(huán)糊精 β-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,藥用級
小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-27 ELISA Kit 雷米普利 Ramipril 質(zhì)量規(guī)格:>98.0,BR
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒Mouseoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T 雷米普利(標準品) Ramipril 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98,標準品
大鼠小腸平滑肌細胞直銷大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pcDNA-AM)感受態(tài)菌DH-5α1毫升 麥冬皂苷B HPLC≥98% 5mg
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pCMV5-AM)感受態(tài)菌DH-5α1毫升 麥冬皂苷A HPLC≥98% 10mg
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM)感受態(tài)菌DH-5α1毫升 麥冬內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg
大鼠腎上腺髓質(zhì)素基因引物對2OD 麥冬黃烷酮A HPLC≥98% 10mg
大鼠腎上腺總RNA20微克 麥冬苷元OαL吡喃鼠李糖基(→)βD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒RaeninELISAKit 96T/48T 麥迪霉素(標準品) Midecamycin 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
大鼠腎素(Renin)試劑盒 Rat Renin ELISA Kit 麥迪霉素 Midecamycin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T 買麻藤醇 GC≥97% 20mg
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒 Rat Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 嗎替麥考酚酯-d4 Mycophenolate Mofetil-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)試劑盒 Rat renal tumor aigen,RAGE ELISA kit 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標準品) Mycophenolate Mofetil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品