細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
小鼠心肌細(xì)胞(乳鼠)價(jià)格 | T25m2 | CS-963810 |
小鼠心肌細(xì)胞(乳鼠)【Mouse Cardiac: Normal Myocardial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
RatInsulin,INS大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 植酮 HPLC≥98% 20mg
RatInsulin,INSELISA試劑盒大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 漆黃素; 紫鉚素 HPLC≥98% 20mg
Ratinsulinaoaibodies,IAA大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 紫杉脂素 HPLC≥95% 20mg
Ratinsulinaoaibodies,IAAELISA試劑盒大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異葉波羅蜜環(huán)黃酮素 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 原千金藤那布任堿 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雪松素 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異魚藤色烯異黃酮 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 脫氧阿枯明 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氧基白屈菜季銨堿 HPLC≥95% 20mg
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 掌葉半夏堿戊 HPLC≥95% 20mg
Ratglucoprotein130,gp130ELISAKit大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 坎地沙坦酯 Candesartan cilexetil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Arf1鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 坎地沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Candesartan cilexetil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseHexokinase,HKELISA試劑盒小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 卡奈替尼 Canertinib 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF1 ELISA Kit GEMSA 2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝Santa,99%
豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit 96T/48T 枸櫞酸噴托維林/托可拉斯/妥克拉司 Carbetapentane /Pentoxyverine 質(zhì)量規(guī)格:含量98.0%~100.5%
牛降鈣素(CALCA/CALC)試劑盒 Bovine Calcitonin,CALCA/CALC ELISA kit 卡洛芬 Carprofen 質(zhì)量規(guī)格:>99%
英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)-4(BMP-4)規(guī)格:96T/48T 卡洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Carprofen 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物細(xì)胞/組織莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5 長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Catharanthine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA試劑盒大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿苯達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Albendazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF/FGF-1 ELISA Kit 阿苯達(dá)唑 Albendazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠心肌細(xì)胞(乳鼠)價(jià)格腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)瓦辛斯泰雷(WahinStarry)銀染試劑盒50 葡萄糖酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) gluconate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)亞藍(lán)(METHYLENEBLUE)染色試劑盒50 葡萄糖酸鉀(AR) Potassium-D-gluconate 質(zhì)量規(guī)格:AR
腸致病性大腸桿菌(EeropathogenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20 葡萄糖酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium gluconate 質(zhì)量規(guī)格:檢查
超白金TAGDNA聚合酶200U 葡萄糖酸鈣 Calcium gluconate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10 葡萄糖-6-脫氫酶,硫酸銨懸浮液 Glucose-6-phosphate dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格:酶活>200 NADP units/mg,BC
超敏型ECL印跡化學(xué)發(fā)光溶液A液:100毫升B液:500微升1000cm2 葡萄糖-6-脫氫酶 Glucose-6-phosphate dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格:酶活:>200 NADP units/mg,BC
超敏型HRP-TMB底物顯色試劑盒10/50 葡萄素 HPLC≥95% 20mg
*AP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液10毫升 葡萄醇 D HPLC≥98% 5mg
*HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液10毫升 葡醛酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-FLUOROCINNAMONITRILE 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
*化學(xué)封閉溶液10毫升 葡醛內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Glucurolactone 質(zhì)量規(guī)格:檢查
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。