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更新時間:2017-07-17 12:53:45瀏覽次數(shù):285次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL保存詳細說明書:
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 Human Thymosin β4 ELISA Kit
軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgG ELISA Kit
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellaantibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試劑盒 Human ANGPTL4 ELISA kit
人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒 ,英文名: HIT ELISA Kit
RatInterleukin18,IL-18ELISA試劑盒大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglucoprotein130,gp130ELISA試劑盒人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin8,IL-8ELISAKit人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肺炎病毒(PVM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hirudin (Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素(Hirudin)ELISA試劑盒
Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit 人11去輕血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanapoproteinA5,apo-A5ELISA試劑盒人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體外膜脂質(zhì)薄層色譜(TLC)分析檢測試劑盒10次
HumanT-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISAKit人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(S)-HODE-biotin (100 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadiene-(2-biotinyl)hydrazide; 13(S)-HODE-biotin
RHC-80267 (10 mg) U-57908; 1,1’-[O,O’-[1,6-hexanediylbis(iminocarbonyl)]dioxime]
鬼筆環(huán)肽-iFluor 350偶聯(lián)物 Phalloidin-iFluor 350 Conjugate
Butylone-d3 (xy7nochloride) (500 ug) 1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(metxyl-d3-amino)-1-butenone, monoxy7nochloride; β-keto MBDB-d3; Butylone-d3 (xy7nochloride)
Oleic Acid (10 g) 9Z-Octadecenoic acid; Oleic Acid
4a- Pseudolaric Acid B
HCV Core Protein (19-25)Pro-Gln-Asp-Val-Lys-Phe-Pro
β-Amyloid (35-25)Met-Leu-Gly-Ile-Ile-Ala-Gly-Lys-Asn-Ser-Gly
[Pyr11]-Amyloid β-Protein (11-40)Pyr-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val
BombesinPyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
PAR-1(1-6) (mouse, rat)Ser-Phe-Phe-Leu-Arg-Asn
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL保存環(huán)己醇CyclohexanolCP500mL
SH85000透析袋夾子 8cm8cm0
C0182-5gCytidine 胞嘧啶核苷65-46-35g
Marker III250ul*5
L-亮安酸25g
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