當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品>> DNA 稀釋液10mL規(guī)格
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更新時間:2017-07-17 12:48:42瀏覽次數(shù):356次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)DNA 稀釋液10mL規(guī)格步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
DNA 稀釋液10mL規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進(jìn)行。
DNA 稀釋液10mL規(guī)格詳細(xì)說明書:
DNA 稀釋液10mL規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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RatL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA試劑盒大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellapneumophilaantigen,LPAgELISAKit人軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 ,英文名: OSX ELISA Kit
人血管舒緩激肽(BK)ELISA檢測試劑盒HumanBradykinin,BKELISAKit 96T/48T
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫試劑盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit
CLIAKitfor人高香草酸(HVA)ELISAKit人高香草酸規(guī)格:48T/96T
磷酸二酯酶4A(Phosphodiesterase4A)0.25單位
ELISAKitMCP/CD46人膜輔蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒
HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanApolipoproteinH,apo-HELISA試劑盒人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體核糖體分離試劑盒10次
HumanTNFαconvertingenzyme,TACEELISAKit人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(S)-HODE cholesteryl ester (50 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13(S)-HODE cholesteryl ester
Darapladib (25 mg) SB 480848; N-[2-(dietxylamino)etxyl]-2-[[(4-fluoropxenyl)metxyl]thio]-4,5,6,7-tetraxy7no-4-oxo-N-[[4’-(trifluorometxyl)[1,1’-bipxenyl]-4-yl]metxyl]-1H-cyclopentapyrimidine-1-acetamide
鬼筆環(huán)肽-Tetrametxyl羅丹明偶聯(lián)物 Phalloidin-Tetrametxylrhodamine Conjugate
Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate (5 mg) dibutyl 3-xy7noxybutyl esterdibutyl 3-xy7noxybutyl ester-phosphoric acid; TBP-OH; Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate
Elaidic Acid (250 mg) 9E-octadecenoic acid; trans-Oleic Acid; Elaidic Acid
(3aR, Cantharidin
HBVpol655, HBV polymerase (655-663)Ala-Leu-Met-Pro-Leu-Tyr-Ala-Cys-Ile
β III probeSer-Ser-Glu-Ala-Cys-Val-Gly-Arg-Trp-Met-Leu-Cys-Glu-Gln-Leu-Gly-Val-Ser-Arg
[pY185]MAP (177-189) kinaseAsp-His-Thr-Gly-Phe-Leu-Thr-Glu-Tyr(PO3H2)-Val-Ala-Thr-Arg
Boc-PRR-AMCBoc-Pro-Arg-Arg-AMC
Pannexin-1 Fragment (4515)Glu-Lys-Asn-Ser-Arg-Gln-Arg-Leu-Leu-Asn-Pro-Ser
DNA 稀釋液10mL規(guī)格聚乙二醇1000Polyetxylene Glycol 1000CP500g
MD34-3.5透析袋(半周長44mm,直徑28mm,截留分子量3500Da)500英尺(152.4米)0
A0512-250MGAmylose 直鏈淀粉9005-82-7250mg
Long Taq DNA Polymerase250U*5
L-乳酸脫氫酶10KU
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