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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品>> 暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書
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更新時(shí)間:2017-07-17 12:49:22瀏覽次數(shù):204次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書詳細(xì)說(shuō)明書:
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒 ,英文名: F-TESTO ELISA Kit
人*原激活肽(TAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humantrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 96T/48T
大鼠白介素17(IL-17)免疫試劑盒 Rat Interleukin 17,IL-17 ELISA KIT
CLIAKitforTB-AbIgG(HumantuberculosisantibodyIgG)ELISAKit人結(jié)核菌桿抗體IgG規(guī)格:48T/96T
人體hTERT基因甲基化檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitRSV人抗呼吸道合胞病毒抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)ELISA試劑盒 ,英文名: NAGα ELISA Kit
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanangiostatinELISAKit 96T/48T
大鼠胱天蛋白酶7(P7)免疫試劑盒 Rat Caspase-7,P7 ELISA kit
CLIAKitfor大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153規(guī)格:48T/96T
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase5A)0.25單位
ELISAKitIAP人免疫抑制酸性蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedantigen,FⅧ-AgELISAKit 人*Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanapelin12,AP12ELISA試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次
HumanTotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(R)-HODE cholesteryl ester (100 ug) 13R-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13(R)-HODE cholesteryl ester
LB 42708 (1 mg) [1-[[1-[(4-bromopxenyl)metxyl]-1H-imidazol-5-yl]metxyl]-4-(1-naphthalenyl)-1H-pyrrol-3-yl]-4-morpholinyl-metxanone
Fluorescein dicaprylate WS1 Fluorescein dicaprylate WS1
Levetiracetam (5 mg) (αS)-etxyl-2-oxo-1-pyrrolidineacetamide; UCB-L 059|Kea ; Levetiracetam
Stearoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-octadec*; Ceramid|Stearic Acid Ethanolamide; Stearoyl Ethanolamide
5,7-Dixy7noxy-2-(4-xy7noxypxenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Chamomile; Flavone; NSC 83244; Versulin Apigenin
HBV core protein (128-140)Thr-Pro-Pro-Ala-Tyr-Arg-Pro-Pro-Asn-Ala-Pro-Ile-Leu
β- Amyloid (4-10)Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr
[Pro34]-Neuropeptide Y, human, rat; [Pro34]-NPY, human, ratTyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr- NH2
Boc-Cholecystokinin Octapeptide (3-8)Boc-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
Pancreatic Polypeptide (rana temporaria)Ala-Pro-Ser-Glu-Pro-His-His-Pro-Gly-Asp-Gln-Ala-Thr-Gln-Asp-Gln-Leu-Ala-Gln-Tyr-Tyr-Ser-Asp-Leu-Tyr-Gln-Tyr-Ile-Thr-Phe-Val-Thr-Arg-Pro-Arg-Phe-NH2
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè)說(shuō)明書鄰甲基本甲酰錄o-Toluoyl chloride250mL
MD44-7透析袋(半周長(zhǎng)44mm,直徑28mm,截留分子量7000Da) 5米/卷0
M5885-100GMaltose 麥芽糖16984-36-4100g
dNTP Mix1ml(2.5mM)
litxium acetate dihydrate250g
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