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更新時(shí)間:2017-07-17 12:50:09瀏覽次數(shù):222次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)AP 標(biāo)記的抗*抗體10μL特點(diǎn)詳細(xì)說明書:
AP 標(biāo)記的抗*抗體10μL特點(diǎn)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
AP 標(biāo)記的抗*抗體10μL特點(diǎn)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
AP 標(biāo)記的抗*抗體10μL特點(diǎn)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)免疫試劑盒 Human thymus independent antigen,TI-Ag ELISA Kit
乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatLuteinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneα/melanomagrowthstimulatingactivity,GROα/MGSAELISA試劑盒人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白α亞基(HB-α)免疫試劑盒 Human α-subunits of hemoglobin,HB-α ELISA Kit
人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 ,英文名: ANA ELISA Kit
RatInterleukin10,IL-10ELISA試劑盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin2,IL-2ELISAKit人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肝炎病毒抗體(HV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human decay accelerating factor (DAF/CD55) ELISA Kit 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA試劑盒
HumanTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAnti-titinAntibody,TTNELISA試劑盒人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化型*(GSSG)濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒50次
Humantransforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(R)-HODE (25 ug) 13R-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(R)-HODE
CUDC-101 (25 mg) 7-[[4-[(3-ethynylpxenyl)amino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*
Quest Fluo-8, 鉀鹽 Quest Fluo-8, potewwium salt
Oxandrolone (1 mg) (4bS,7S,9aS,9bR,11aS)-tetradecaxy7no-7-xy7noxy-4aS,6aS,7-trimetxyl-cyclopenta[5,6]naphtho[1,2-c]pyran-2(1H)-one; Anavar|NSC 67068|Oxandrin|SC 11585; Oxandrolone
Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-8Z,11Z,14Z-eicosatrienamide; Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide
Benzylpenicillin potewwium salt Penicillin G potewwium, USP
GRP (1-16) (porcine)Ala-Pro-Val-Ser-Val-Gly-Gly-Gly-Thr-Val-Leu-Ala-Lys-Met-Tyr-Pro
β- Amyloid (1-34)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu
[Phe22] Big Endothelin-1 (19-37), humanIle-Ile-Trp-Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Arg
BNP-26 (porcine)Asp-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg-Arg-Leu-Asp-Arg-Ile-Gly-Ser-Leu-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Val-Leu-Arg-Arg-Tyr (Disulfide bridge:Cys4-Cys5)
PAKtideArg-Arg-Arg-Leu-Ser-Phe-Ala-Glu-Pro-Gly
AP 標(biāo)記的抗*抗體10μL特點(diǎn)1,2-二錄本1,2-DichlorobenzeneCP500mL
MD25-14透析袋(半周長(zhǎng)25mm,直徑16mm,截留分子量14000Da) 5米/卷0
D0555-100mgGDP,Diwo7ium Salt 5’二磷酸鳥苷二鈉7415-69-2100mg
DNA Marker I250ul
Linolenic Acid5g
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