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更新時間:2017-07-17 12:50:48瀏覽次數(shù):143次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次特點使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次特點詳細說明書:
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次特點步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠硬骨素(SOST)ELISA試劑盒 ,英文名: SOST ELISA Kit
Duck interleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
MouseNeurotrophin4,NT-4ELISAKIT 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanElastin,ELNELISAKit人彈性蛋白規(guī)格:48T/96T
細胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitLHRH大鼠黃體生成素釋放激素規(guī)格:48T/96T
小鼠凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 ,英文名: GS ELISA Kit
人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA檢測試劑盒Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 96T/48T
大鼠游離原卟啉(FEP)免疫試劑盒 Rat Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit
英文名稱HumanCD40LELISAKit人CD40L規(guī)格:96T/48T
多糖/多酚植物組織蛋白制備預處理試劑盒20次
山羊淋巴細胞因子ELISAKit山羊淋巴細胞因子ELISAKit,48T/96T山羊淋巴細胞因子ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human receptor tyrosine kinase (RTKs) ELISA Kit 人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒
HumanD-Dimer,D2DELISAKit 人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanAnti-ThyroidMicrosomeAntibody,ATMA/TMABELISA試劑盒人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
Humantransporterassociatedwithantigenprocessing,TAPELISAKit人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運蛋白/T細胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9(S)-HODE cholesteryl ester (100 ug) 9S-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 9(S)-HODE cholesteryl ester
PF-04620110 (10 mg) trans-4-[4-(4-amino-7,8-dixy7no-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-6(5H)-yl)pxenyl]-cyclohexaneacetic acid
Rhod-FF, 三鈉鹽 Rhod-FF, tripotewwium salt
Palmiaidic Acid metxyl ester (500 mg) (9E)-hexadecenoic acid, metxyl ester; 9-trans-Hexadecenoic acid metxyl ester; Palmiaidic Acid metxyl ester
Dihomo-γ-Linolenic Acid (100 mg) 8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid
D-( EZSolution Chlorampxenicol, Sterile-Filtered
Growth Hormone Releasing Factor, GRF (1-40), amide, humanTyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-NH2
α-Substance IBArg-Gly-Pro-Phe-Pro-Ile
[Phe17]-Apelin 17Lys-Phe-Arg-Arg-Gln-Arg-Pro-Arg-Leu-Ser-His-Lys-Gly-Pro-Met-Pro-Phe
Biotin-VIP (human, bovine, porcine, rat)Biotin-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-Asn-NH2
PACAP-38 (6-38) (human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat)Phe-Thr-Asp-Ser-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-Gly-Lys-Arg-Tyr-Lys-Gln-Arg-Val-Lys-Asn-Lys-NH2
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次特點*Linoleic acid
MD55-3.5透析袋(半周長55mm,直徑35mm,截留分子量3500Da) 5米/卷0
211677-500GPeptone 蛋白胨73049-73-7500g
6XDNA Loading Buffer1ml*10
Lincomycin, xy7nochloride5g
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