當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標記及檢測產(chǎn)品>> 雜交管 (35×200mm)1個特點
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更新時間:2017-07-17 12:47:46瀏覽次數(shù):152次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)雜交管 (35×200mm)1個特點步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
雜交管 (35×200mm)1個特點使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
雜交管 (35×200mm)1個特點詳細說明書:
雜交管 (35×200mm)1個特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 ,英文名: INHBP ELISA Kit
*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA檢測試劑盒Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 96T/48T
大鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒 Rat Interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
CLIAKitforTAP(Humantrypsinogenactivationpeptide)ELISAKit人*原激活肽規(guī)格:48T/96T
人體MMP9RFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitAFA/snoRNP/U3RNP人抗核仁纖維蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠YY肽(PYY)ELISA試劑盒 ,英文名: PYY ELISA Kit
人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
英文名稱RatCCL7ELISAKit大鼠CCL7規(guī)格:96T/48T
口腔粘膜細胞基因組DNA純化試劑盒50次
ELISAKitCortisol人*規(guī)格:48T/96T
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒
HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-teichoicacidantibody,TAELISA試劑盒人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物線粒體粗提分離試劑盒10次
HumanTri-iodothyronine,T3ELISAKit人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9(S)-HODE (500 ug) 9S-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HODE
RVX-208 (1 mg) 2-[4-(2-xy7noxyethoxy)-3,5-dimetxylpxenyl]-5,7-dimetxoxy-4(3H)-inoneazolinone
Annexin V-iFluor 700偶聯(lián)物 Annexin V-iFluor 700 conjugate
γ-Linolenoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-6Z,9Z,12Z-octadecatrienamide; γ-Linolenoyl Ethanolamide
γ-Linolenic Acid (1 g) 6Z,9Z,12Z-octadecatrienoic acid; GLA; γ-Linolenic Acid
Fungizone Amphotericin B, USP
G-R-G-D-T-PGly-Arg-Gly-Asp-Thr-Pro
α-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Lys
[Phe1,Ser2,Tyr6]-PAR-1 (1-6) amide (human)Phe-Ser-Leu-Leu-Arg-Tyr- NH2
Biotin-Secretin, humanBiotin-His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val-NH2
PACAP-27 (human, mouse, ovine, porcine, rat)His-Ser-Asp-Gly-Ile-Phe-Thr-Asp-Ser-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-NH2
雜交管 (35×200mm)1個特點多聚價醛penefonmeldehydeAR500g
MK500117錄化*67-48-1100g0
P5638-25GPhosphatidylchoine(Soy) 大豆*8002-43-525g
50bp Ladder250ul
L-Histidine100g
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