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鯡魚精 DNA 溶液1mL保存

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更新時間:2017-07-17 12:43:17瀏覽次數:138次

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鯡魚精 DNA 溶液1mL保存一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

鯡魚精 DNA 溶液1mL保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。

鯡魚精 DNA 溶液1mL保存使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37
反應 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
鯡魚精 DNA 溶液1mL保存詳細說明書:

鯡魚精 DNA 溶液1mL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
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15S-HEDE 50 ug     15S-xy7noxy-11Z13E-eicosadienoic acid; 15S-HEDE

α-difluorometxyl-DL-Arginine 1 mg     DFMA|RMI 71897 2-difluorometxylarginine

Tetrametxylrhod-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液(pH 7。5     Tetrametxylrhodamine-dUTP 1 mM in Tris Buffer pH 75

Tricosanoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-tricos*; Tricosanoyl Ethanolamide

5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide 1 mg     N-2-xy7noxyetxyl-5Z,8Z,11Z-eicosatrienamide; Mead Acid Ethanolamide; 5Z),8Z),11Z-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide

emmonieted Ruthenium Oxychloride     Ruthenium Red
gp100 (614-622)Leu-Ile-Tyr-Arg-Arg-Arg-Leu-Met-Lys

α-Conotoxin SIIle-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Gly-Pro-Lys-Tyr-Ser-Cys- NH2 (Disulfide bridges: Cys2-Cys7, Cys3-Cys13 )

[Met5,Arg6] Enkephalin-ArgTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Arg

Biotin-MBP Derivatized PeptideBiotin-LC-Phe-Phe-Lys-Asn-Ile-Val-Thr-Pro-Arg-Thr-Pro-Pro-Pro-Ser-Gln-Gly-Lys-NH2

P55-TNFRPro-Gln-Ile-Glu-Asn-Val-Lys-Gly-Thr-Glu-Asp
鯡魚精 DNA 溶液1mL保存正辛烷OctaneAR500mL

709980-5G甲基乙基砜(EMS)etxyl metxyl sulfone 594-43-45G0

A0332-50GAlbumin Bovine,Fraction V 牛血清白蛋白(五組分)9048-46-850g

Yeast DNA Kit100T

L-半胱安酸鹽酸鹽25g

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