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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品>> SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)
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更新時(shí)間:2017-07-17 12:41:48瀏覽次數(shù):331次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)詳細(xì)說明書:
SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)免疫試劑盒 human STAT5 ELISA Kit
醇脫氫酶(ADH)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanheartfattyacidbindingprotein,h-FABPELISA試劑盒人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanleukocyteantigenC,HLA-CELISAKit人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠25kDa突觸關(guān)聯(lián)蛋白(SNAP25)ELISA試劑盒 ,英文名: SNAP25 ELISA Kit
人血栓素B2(TXB2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T
大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)免疫試劑盒 Rat β amyloid precursor protein,βAPP ELISA Kit
CLIAKitforTSHELISAKit大鼠促甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
胚胎干細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial)定向分化試劑盒5次
ELISAKitgranulysin人顆粒溶素規(guī)格:48T/96T
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
humanfreeEstriol,FE3ELISAKIT 人游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-PL12-antibody,PL12/AlaRSELISA試劑盒人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒50次
Humantumor-associatedantigen,TAAELISAKit人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
15(S)-HETrE (25 ug) 15S-xy7noxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid; 15(S)-HETrE
Carprofen (500 mg) Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid
iFluor 555-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 555-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Prostaglandin E1 etxyl ester (500 ug) 11α,15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, etxyl ester; Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester; Prostaglandin E1 etxyl ester
13(Z)-Docosenoic Acid (50 mg) 13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid
D-( Chlorampxenicol
GM-CSFAsn-Ala-Ile-Gln-Glu-Ala-Arg-Arg-Leu-Leu-Asn-Leu-Ser-Arg-Asp
α-CGRP (30-37) (canine, mouse, rat)Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2
[Met2]-DeltorphinTyr-Met-Phe-His-Leu-Met-Asp-NH2
Biotin-Insulin Receptor (1142-1153), amideBiotin-Thr-Arg-Asp-Ile-Tyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys-NH2
Oxyntomodulin (human, mouse, rat)His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala
SSC 溶液 ,20×100mL特點(diǎn)月桂酸Lauric acidCP250g
CA1091-25gN-乙酰-D-安基葡萄糖7512-17-625g0
F8630-1GFibrinogen 纖維蛋白原(牛血)9001-32-51g
Total RNA Kit100T
L-Arginine500g
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