當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標記及檢測產(chǎn)品>> TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格
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更新時間:2017-07-17 12:37:24瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格詳細說明書:
TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠胰淀素(IAPP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
Mouse endothelial nitric oxide synthase (eNOS) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancyclophilinA,CyPAELISAKit人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A規(guī)格:48T/96T
細胞ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒50次
ELISAKitCasp-3大鼠胱天蛋白酶3規(guī)格:48T/96T
小鼠白三烯A4水解酶(LTA4H)ELISA試劑盒 ,英文名: LTA4H ELISA Kit
人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA檢測試劑盒Humanplaetbasicprotein,PBPELISAKit 96T/48T
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)免疫試劑盒 Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA KIT
英文名稱RatLHELISAKit大鼠促黃體激素(LH)規(guī)格:96T/48T
細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)NBT比色法定量檢測試劑盒100次
ELISAKitEMA人上皮膜抗原規(guī)格:48T/96T
小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat lymphocyte factor ELISA Kit 大鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒
humancorticotropinreleasinghormone,CRHELISAKit 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanantimousantibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物羥賴氨酸(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20次
Humanurinaryfreecortisol,UFCELISAKit人尿游離*(UFC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Lyso-PAF C-16-d4 (5 mg) 1-O-hexadecyl-(7,7,8,8-d4)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4; Lyso-PAF C-16-d4
UNC3230 (5 mg) 5-[(cyclohexylcarbonyl)amino]-2-(pxenylamino)-4-thiazolecarboxamide
PerCP-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml PerCP-streptavidin conjugate 1 mg/ml
CAY10679 (50 mg) 1,1’-(1,8-dioxo-1,8-octanediyl)bis[glycyl-glycine; N,N’-bis(glycyl-glycine)-hexane-1,6-Dicarboxyamide; CAY10679
Linoleic Acid (peroxide free) (100 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid (peroxide free)
2-(Phosphonometxyl)pentane-1,5-dioi NAALDase Inhibitor, Pmpe
GLP-1 (7-36)-Lys(biotinyl) amide (human, bovine, guinea pig, mouse, rat)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys(bio) -NH2
WWamide-3Trp-Lys-Gln-Met-Ser-Val-Trp-NH2
[Leu15]-Gastrin I (human)Pyr-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe-NH2
Biotin-a-CGRP (canine, mouse, rat)Biotin-Ser-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asp-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2 (Disulfide bridge:Cys2-Cys6)
Opioid receptor antagonistAc-Arg-Phe-Met-Trp-Met-Lys-NH2
TdT 加尾法 DNA *標記試劑盒5次規(guī)格三錄乙酸Trichloroacetic acidAR500g
CA1341-100g瓊脂糖9012-36-6100g0
ER0601Pae I500 units
質(zhì)粒小量提取試劑盒50T
典代乙酰胺(典乙酰胺)5g
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