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細胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 5000T實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:42:37瀏覽次數(shù):240次

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細胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 5000T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 5000T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
MDA-MB-468(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人脊髓星形膠質(zhì)細胞RNAHA-sp miRNA5 μg

ANGPTL4 Others Human ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照)

MCF-7(OLD)細胞,人癌細胞 小鼠腎癌細胞,RenCa細胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞

CL-0408NEC(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 軟骨細胞培養(yǎng)基CM
CL-0144LoVo(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2

GPT2 Others Rat 大鼠 GPT2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人腎系膜細胞裂解物HRMCL

SK-OV-3[SKOV-3]細胞,人卵巢癌細胞 人支氣管上皮細胞,HBE細胞 腦膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF

TEK Others Human Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照)
SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)

CM-H030人外周血白細胞*培養(yǎng)基100mL

MG-63, 人骨肉瘤細胞 肝癌細胞,CBRH-7919細胞 TT(人骨髓樣甲狀腺癌細胞)

正常小鼠Sertoli細胞;TM4

CD7 Others Human CD7 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠酸脫氫酶磷酸酶(PDP)ELISA試劑盒 ,英文名: PDP ELISA Kit

人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA檢測試劑盒Humancytovillin/ezrinELISAKit 96T/48T

大鼠可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)免疫試劑盒 Rat soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit

英文名稱RatBSAELISAKit大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測規(guī)格:96T/48T

*腸毒素E(Staphylococcusaureus:enterotoxinE)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20

ELISAKitGROβ/CXCL2/MGSA人生長調(diào)節(jié)致癌基因β規(guī)格:48T/96T
小鼠Ⅱ型膠原(Col )ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒

HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人*/苯丙酸去*(NP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanconcanavalinA,ConAELISA試劑盒人刀A(ConA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織CDK5/P25激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanProteinase3Antibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞膜紫色熒光染色試劑盒BBcellProbe M04 5000T實驗方法人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗*(AT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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