*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CNE-2Z(人鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人羊膜細(xì)胞;WISH

HGF Others Cynomolgus 食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

2V6.11細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3X63Ag8.653細(xì)胞 CL-0405NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

THP-1人單核白血病細(xì)胞

hMNC-CB-c single donorultra-pure 臍帶血來源的人類單核細(xì)胞 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC
人結(jié)腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞HCoMEC

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

KMB 人胚肺成纖維樣細(xì)胞

CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞RNAHCSMC miRNA5 μg

GIST 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞

CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人少突膠質(zhì)細(xì)胞

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒 Human SOCS-3 ELISA Kit

總巰基測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanhistatin5,HTN5ELISA試劑盒人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat vitamin E (VE) ELISA Kit 大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒

Human5-Hydroxytryptamine,5HISAKit 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISA試劑盒人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-B激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanPyridinoline,PYDELISAKit人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
*堿性品紅溶液(5%/0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸肌酸激酶(CPK)Elisa試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝