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更新時(shí)間:2017-07-06 09:54:21瀏覽次數(shù):211次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2
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Calu-6細(xì)胞,人肺癌細(xì)胞系(未分化) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
HUAEC-c 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUAEC) 500,000cells 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
甲苯胺藍(lán)染色液(軟骨)50ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
甲苯胺藍(lán)染色液(軟骨)50ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
甲苯胺藍(lán)染色液(軟骨)50ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002
NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞RNAHSkMSC miRNA5 μg
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S-180細(xì)胞,小鼠門肉瘤細(xì)胞 THP-1(單核細(xì)胞白血病) 人細(xì)胞;C-33A
集落刺激因子
SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠Ⅻ型膠原(COL12)ELISA試劑盒 ,英文名: COL12 ELISA Kit
人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T
大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)免疫試劑盒 Rat Pneumonia Virus Antibody,PV-Ab Elisa kit
CLIAKitforu-T3ELISAKit大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
擬南芥葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5次
ELISAKitTH人*羥化酶規(guī)格:48T/96T
小鼠β酚(β-naphthol)LISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 人維生素B12(VB12)ELISA試劑盒
Humananti-cartilage-antibodyELISAKit 人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCentromereProtein,CENP-BELISA試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON809品系基因檢測(cè)試劑盒20次
HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍(lán)染色液(軟骨)50ml實(shí)驗(yàn)方法人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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