甲苯胺藍(lán)染色液(細(xì)胞)50ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
甲苯胺藍(lán)染色液(細(xì)胞)50ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
甲苯胺藍(lán)染色液(細(xì)胞)50ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12

EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Calu-3細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞 CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠顆粒細(xì)胞RGC

NCI-H1703[H1703]細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞,5637(HTB-9)細(xì)胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC

貂源細(xì)胞

MMP7 Others Human 人 MMP7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNAHSkMSC cDNA

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5 *(含100mL 酶解緩沖液) 10mL

細(xì)胞名稱 種屬

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒 Human PAPP-A ELISA Kit

Mousekeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

IGF-I(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 大鼠生長激素釋放肽ghrELISA試劑盒

HumanProcalcitonin,PCISAKit 人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancellularfibronectin,cFnELISA試劑盒人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米MON802品系基因檢測(cè)試劑盒20次

humanserumamyloidA3,SAA3ELISAKit人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
甲苯胺藍(lán)染色液(細(xì)胞)50ml免費(fèi)代測(cè)人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝