當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞染色>> 甲苯胺藍染色液(細胞)20ml使用說明書
細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
甲苯胺藍染色液(細胞)20ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
甲苯胺藍染色液(細胞)20ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
甲苯胺藍染色液(細胞)20ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SHZ-88(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA
REG1A Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 (陽性對照)
SK-MES-1細胞,人肺鱗癌細胞 狗腎細胞,MDCK細胞 CM-M066小鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
支氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HFDPC-c 人類的毛細胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
T-107A*(含10mL酶解緩沖液)1mL
HEp-2細胞,人喉表皮樣癌細胞 人臍靜脈內皮細胞,HUVE-12/CRL2480細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
C2C12(小鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2
CNTN1 Others Human 人 CNTN1 / Contactin-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人骨骼肌成肌細胞總RNAHSkMM tRNA
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A
NCI-H446[H446]細胞,小細胞肺癌細胞 人癌細胞系,ZR-75-30細胞 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712
小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)
IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人相撲結合酶UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)免疫試劑盒 Human SUMO-conjugating enzyme UBC9,UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA kit
γ-谷酰轉肽酶(γ-GT)活性測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatMetallothionein,MISA試劑盒大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISA試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人維生素A(VA)ELISA試劑盒
HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancecropinB,CecBELISA試劑盒人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉基因玉米GA21品系基因檢測試劑盒20次
HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲苯胺藍染色液(細胞)20ml使用說明書人受體酪酸激酶(RTKs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin2(Eotaxin2/CCL24)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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