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乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:50:44瀏覽次數(shù):215次

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乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶(hù)選購(gòu)!

乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2

IFNA8 Others Human Interferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

A549/DDP細(xì)胞,耐DDP肺癌細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞HHGMC

Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
CM-R116大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 mouse myeloma cell line [NS-1] DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

UACC-812(人導(dǎo)管瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 EB-3 [EB3](人淋巴樣Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]

CRT 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

MHCC-97H人肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H human hepatoma cells (high transfer) DMEM+10%FBS

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人晶狀體上皮細(xì)胞 (HLEpiC)( 5×105 ) HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系 Human
小鼠含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA1 ELISA Kit

人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 96T/48T

大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒 Rat Hya]uronate binding protein,HABP ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatHbA1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)規(guī)格:96T/48T

化學(xué)發(fā)光免疫印跡消除試劑盒20

ELISAKitVEGF-D人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D規(guī)格:48T/96T
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human advanced oxidation protein products (AOPP) ELISA Kit 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒

Humanbonesialoprotein,BSPELISAKit 人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCathepsinAntibodies,CathAbELISA試劑盒人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)MS8品系基因檢測(cè)試劑盒20

humansimilartoRIKENcDNA2010109K09geneELISAKit人類(lèi)似RIKENcDNA2010109K09基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)人肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胎球蛋白AFETU-AELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

我司乳酸酚棉藍(lán)染色液100ml使用說(shuō)明書(shū)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶(hù)提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢(xún)

 

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