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黑色素染色試劑盒(*法)3×50ml使用說明書

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黑色素染色試劑盒(*法)3×50ml使用說明書RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

SLAMF1 Others Rat 大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H2227細胞,人肺小細胞肺癌 大鼠肝細胞,BRL大鼠Buffalo細胞 CM-R063大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

人主動脈平滑肌細胞HASMC

Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium DXF, M2-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml

黑色素染色試劑盒(*法)3×50ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
黑色素染色試劑盒(*法)3×50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
黑色素染色試劑盒(*法)3×50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
CL-0228T-47D(人管癌細胞)5×106cells/瓶×2

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM-3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人食道上皮細胞cDNAHEEpiC cDNA

LCC2細胞,人癌Tamoxifen耐藥株 草魚肝臟細胞,L8824細胞 肝內(nèi)膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

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HVMF Pellet 人類絨毛間質(zhì)成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦血管平滑肌細胞裂解物HBVSMCL
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