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更新時間:2017-07-06 09:46:11瀏覽次數(shù):557次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
細胞普魯士藍染色試劑盒2×20ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
細胞普魯士藍染色試劑盒2×20ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
非洲綠猴腎細胞;VERO
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H157細胞,人非小細胞肺腺癌細胞 小鼠門肉瘤細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
人脂肪微血管內(nèi)皮細胞HAMEC
Promocell C-28051 Monocyte Attachment Medium, 單核細胞附著培養(yǎng)基(即用型) 250ml
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
轉(zhuǎn)化細胞
P3X63Ag8細胞,骨髓瘤細胞 人十二指腸腺癌細胞,HuTu-80細胞 CM-H029人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠心肌細胞(RCM)(1×106)
人肝細胞RNAHH miRNA5 μg
荷蘭黑白花奶牛牛肺細胞;DCL1
T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞 Human
EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A7 ELISA Kit
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Humancardiotrophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T
大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
英文名稱Rat17-HydroxycorticosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T
裂解液VIII:細菌活性化蛋白制備溶液20次
ELISAKitvisfatin人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Three rat triiodothyronine (T3) ELISA Kit 大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒
HumanOsteopontin,OPNELISAKit 人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCartilageglycoprotein39,HCgp-39ELISA試劑盒人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因大豆GTS40.3.2品系基因檢測試劑盒20次
HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞普魯士藍染色試劑盒2×20ml使用說明書人維生素A(VA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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