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更新時間:2017-07-06 09:45:44瀏覽次數(shù):268次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Lillie三價鐵染色試劑盒2X50ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Lillie三價鐵染色試劑盒2X50ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H1650細胞,人肺支氣管癌細胞 小鼠前列腺癌細胞,RM-1細胞 CM-R031大鼠腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
人骨髓間充質(zhì)干細胞HMSC-bm
Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹突狀細胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml
CL-0379MCF 7B(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
HDAC8 Others Human 人 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-總RNAHCM-a tRNA
THP-1細胞,人單核細胞 人肺腺癌細胞,H1299細胞 A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株
家貓腎細胞;CATK1
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肝細胞cDNAHH cDNA
大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E
HepG2.2.1.5細胞,人肝癌細胞 人星形膠質(zhì)瘤細胞,U251細胞 大鼠腎系膜細胞;RMC
K-562(人慢性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25120 Hepatocyte Maintenance MediumKIT, 肝細胞維持培養(yǎng)液套裝 500ml
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)免疫試劑盒 Human cardiotrophln 1 ELISA Kit
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhemagglutinin,HAELISA試劑盒人血凝素(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit 人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancardiotrophln1,CT-1ELISA試劑盒人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品NOS基因檢測試劑盒20次
Humansolubleadhesionmolecules,SamELISAKit人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Lillie三價鐵染色試劑盒2X50ml售后服務人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素D(VD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素C(VC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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