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更新時間:2017-07-06 09:44:37瀏覽次數(shù):133次
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天青石藍蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
天青石藍蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
天青石藍蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
PIEC(豬髖動脈內(nèi)皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2
獼猴皮膚細胞;MMS7
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H460細胞,人大細胞肺癌細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化),PC-12細胞 CM-R007大鼠支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠雪旺細胞RSC
Promocell C-28025 Endothelial Progenitor Medium, 內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml
人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μg
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12細胞,大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) HT-29(結腸癌細胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標簽)
SVEC4-10(小鼠淋巴結內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肝細胞;HL-7702[L-02]
NCI-H460 人大細胞肺癌細胞
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞
人臍帶血單個核細胞
人胚腎細胞;2V6.11 人胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠Mdm2小鼠p53結合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 ,英文名: MDM2 ELISA Kit
人心鈉肽(ANP)ELISA檢測試劑盒HumanAtrialNatriureticPeptide,ANPELISAKit 96T/48T
大鼠骨織素(Ostn)免疫試劑盒 Rat osteocrin,Ostn ELISA Kit
CLIAKitfor大鼠Smad1ELISAKit大鼠Smad1規(guī)格:48T/96T
磷脂酰*PS(phosphatidylserine)高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitIg-j*j鏈規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancardiacisoformofTropninT,cELISA試劑盒人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒載體轉染試劑盒10次
HumanSolubleClusterofdifferentiation30ligand,sCD30LELISAKit人可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
天青石藍蘇木素染色試劑盒2X50ml使用說明書人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃動素(MTL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原C(PG-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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