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更新時間:2017-07-06 09:35:08瀏覽次數(shù):129次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
阿利新藍染色試劑盒(pH1.0)3×50ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
阿利新藍染色試劑盒(pH1.0)3×50ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
阿利新藍染色試劑盒(pH1.0)3×50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2
人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)
NP69-SV40T細胞,永生化鼻咽上皮細胞系 小鼠細胞,C127細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2
軟骨細胞生長添加物CGS
Promocell C-23160 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium KIT, 骨骼肌細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
IFNA10 Others Human 人 Interferon alpha 10 / IFNA10 人細胞裂解液 (陽性對照)
AE-2 雜交瘤細胞抗 AChE
HuH-7人肝癌細胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS
TGFB1 Protein Mouse 重組小鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標簽)
人腎近端小管上皮細胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞 Mouse
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺泡上皮細胞HPAEpiC
KM9304 EBV-轉化人淋巴細胞(彝族)
CM-H099人真皮淋巴上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)
人癌細胞;MDA-MB-231 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 ,英文名: NP-Y ELISA Kit
人胸苷酸合成酶(TS)ELISA檢測試劑盒Humanthymidylatesynthetase,TSELISAKit 96T/48T
鵝骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒 Goose Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
CLIAKitforPlantVitaminB6,VB6ELISAKit植物維生素B6規(guī)格:48T/96T
石蠟切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
ELISAKitAZT人*規(guī)格:48T/96T
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒
Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanC-typenatriureticpeptide,CNPELISA試劑盒人C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織質(zhì)膜(plasmamembrane)分離試劑盒20次
Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sTRAILELISAKit人可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿利新藍染色試劑盒(pH1.0)3×50ml使用說明書人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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