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黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:34:13瀏覽次數(shù):107次

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黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CCC-HEL-1細(xì)胞,人胚肝二倍體細(xì)胞 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II B2細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8

細(xì)胞凍存液CFM

Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

MDA-MB-157細(xì)胞,癌細(xì)胞 人胎盤絨膜癌細(xì)胞,BeWo細(xì)胞 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg

恒河猴腎細(xì)胞;MMK2

EPHB6 Others Human EphB6 / EPHB6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
GPR56 Others Human GPR56 / TM7LN4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520

MDA-MB-468 人癌細(xì)胞

HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

SCGB1A1 Protein Human 重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人胚胎肌肉組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HSM-2 人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)免疫試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測(cè)試盒 紫外分光光度法 25/24

RatlymphocytefactorELISA試劑盒大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISA試劑盒人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLeptospiraIgGLepIgGELISAKit人鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat intact parathormone (i-PTH) ELISA Kit 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒

Humanproteintyrosinekinase,PTKELISAKit 人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISA試劑盒人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物組織線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒20

HumanSomatostatin,SSELISAKit人*(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費(fèi)代測(cè)人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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