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更新時間:2017-07-06 09:29:37瀏覽次數(shù):189次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
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過氧化物酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×20ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
過氧化物酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×20ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
LTEP-a-2(人肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠紅白血病細胞;MEL
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照)
LM3細胞,人高轉移肝癌細胞 小鼠白血病細胞,M1細胞 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
人支氣管平滑肌細胞裂解物HBSMCL
Promocell C-21160 Airway Epithelial Cell GrowthMedium KIT,呼吸道上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
家貓腎細胞;CATK1
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
JeKo-1 人套細胞淋巴瘤細胞
22RV1人前列腺癌細胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人前列腺癌
其他細胞因子
小鼠海馬趾神經(jīng)細胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結直腸癌細胞 Human
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺動脈成纖維細胞總RNAHPAF tRNA
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3
JF-305細胞,人胰腺癌細胞 人皮膚癌細胞系,HS-1細胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質母細胞瘤瘤株;G422
HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基2型(即用) 500ml
大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 Human Thymosin β4 ELISA Kit
軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgG ELISA Kit
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellaantibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠補體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒
HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISA試劑盒人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量檢測試劑盒(包括萃取)20次
Humansteroidproducingcellautoantibody,SCAELISAKit人抗類固醇生成細胞抗體(SCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
過氧化物酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×20ml使用說明書人胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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