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更新時間:2017-07-06 09:29:03瀏覽次數(shù):144次
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淀粉樣物質染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
淀粉樣物質染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
淀粉樣物質染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
LoVo(人大腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠淋巴瘤細胞;EL4
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細胞裂解液 (陽性對照)
LX-2細胞,人肝星形細胞正常 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞,HFSF細胞 家貓肺細胞;FCA-L2
人顱骨造骨細胞裂解物HCOL
Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
人前列腺上皮細胞HPEpiC
IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照)
牦牛皮膚細胞;BMU-S1
大鼠癌細胞;MADB106 胃腺癌細胞,AGS細胞 SDBMSC細胞,SD大鼠骨髓間充質干細胞
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 Human
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照)
HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人肺動脈成纖維細胞HPAF
豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02
黑化大家鼠肺成纖維細胞;NRm 管癌細胞,BT549細胞 MA-782細胞,鼠癌細胞系
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 Rattus
EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(TP-5)免疫試劑盒 Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit
軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgM ELISA Kit
Ratlipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒人促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellaantibodyIgG,LPAb-IgGELISAKit人軍團菌抗體IgG(LPAb-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 人*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKi人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次
HumanStromalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit人基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
淀粉樣物質染色試劑盒(甲紫法)2×50ml免費代測人胰多肽(PP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰*(PAMY)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島細胞抗體(ICA)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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