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更新時間:2017-07-06 09:26:53瀏覽次數(shù):161次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
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淀粉樣物質染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
淀粉樣物質染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠肝癌瘤株;H22
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
GBC-SD細胞,人膽囊癌細胞 人APP基因轉染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA
Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質干細胞生長培養(yǎng)基DXF—無血清培養(yǎng)基 500ml
原代腎實質細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2
Calu-6細胞,人肺癌細胞系(未分化) 大鼠肝星形細胞,CFSC-2G細胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
SK-BR-3(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HUAEC-c 人臍動脈內皮細胞(HUAEC) 500,000cells 腸靜脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106)
人肺成纖維細胞;HFL1
蚊子幼蟲體細胞;Aedes albopictus clone C6/36
615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 Mouse
IL12RB2 Others Mouse 小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人雄激素受體(AR)免疫試劑盒 Human androgen receptor,AR ELISA Kit
人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: BB-Ab ELISA Kit
Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA試劑盒大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGrowthHormoneBindingProtein,PELISA試劑盒人生長激素結合蛋白(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISAKit人可溶性半乳糖苷結合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glucocorticoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 人糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒
HumanApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBladdertumorantigen,BTAELISA試劑盒人膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒20次
HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit人P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
淀粉樣物質染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書人乙型腦炎病毒抗體(JE-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乙型肝炎病毒前S1抗原(HBVpreS1Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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