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更新時間:2017-07-06 09:25:22瀏覽次數(shù):166次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞色素氧化酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×50ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)胞色素氧化酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×50ml售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Bel-7402細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人胚纖維細(xì)胞系,HEF細(xì)胞 大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1
人腸平滑肌細(xì)胞cDNAHISMC cDNA
Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
CL-0140LLC(小鼠肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HRGECL
A2780細(xì)胞,人卵巢癌細(xì)胞 鮭魚胚胎細(xì)胞,CHSE細(xì)胞 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HAoSMC Pellet 人主動脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人無色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H157
人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Lewis細(xì)胞,小鼠肺癌細(xì)胞 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A
XCL1 Protein Human 重組人 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠載脂蛋白B(apo-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人溴脫氧核苷*(BrdU)免疫試劑盒 Human bromodeoxyuridine,BrdU ELISA kit
人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-DNase B Ab ELISA Kit
RatLeukotrieneB4,LT-B4ELISA試劑盒大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangranulysin,GNLYELISA試劑盒人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlatentmembraneprotein-1,LMP-1ELISAKit人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat Glucose dependent insulinotropic polypeptide (GIP) ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒
HumanangiostatinELISAKit 人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBeta-HydroxybutyricAcid,β-OHBELISA試劑盒人β丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA純化試劑盒(低多糖/酚)20次
Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞色素氧化酶染色試劑盒(聯(lián)苯胺法)4×50ml售后服務(wù)人游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人游離*狀腺原酸(FT3)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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