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更新時(shí)間:2017-07-06 09:24:31瀏覽次數(shù):203次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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β-半乳糖苷酶染色試劑盒100T使用說(shuō)明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
β-半乳糖苷酶染色試劑盒100T使用說(shuō)明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
β-半乳糖苷酶染色試劑盒100T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠源細(xì)胞
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SMMC-7721細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人退行性癌細(xì)胞,Calu-6細(xì)胞 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5
人前列腺上皮細(xì)胞cDNAHPEpiC cDNA
Promocell C-25210 Hepatocyte Basal Medium , 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500ml
CM-H132人小梁網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞 Mouse macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs) EC109,人食管癌細(xì)胞
人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB 大鼠尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)
DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管動(dòng)蛋白(AMOT)免疫試劑盒 Human AMOT ELISA Kit
人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-IgA-Ab ELISA Kit
Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangranulocytespecificantinuclearantibody,GS-ANAELISA試劑盒人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit*輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycosylated serum protein (GSP) ELISA Kit 人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒
Humanlupusanticoagulant,LAC/LAELISAKit 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbeta2glycoprotein,β2-GPELISA試劑盒人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物種子葉綠體粗提分離試劑盒20次
HumantalinELISAKit人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
β-半乳糖苷酶染色試劑盒100T使用說(shuō)明書人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人載脂蛋白C3(APO-C3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人載脂蛋白C2(Apo-C2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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