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更新時間:2017-07-06 09:22:47瀏覽次數(shù):206次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
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堿性磷酸酶染色試劑盒4×20ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
堿性磷酸酶染色試劑盒4×20ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
JEG-3(人絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠肝細胞;BRL 3A
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)
HPAC細胞,人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細胞,T6細胞 雜交瘤(B類);C3110D2E11
人間充質(zhì)干細胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA
Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
CL-0261BC-022(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 人細胞裂解液 (陽性對照)
人髓核細胞cDNAHNPC cDNA
T47D細胞,人管癌細胞 豬腎細胞系,IBRS-2細胞 肺成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2
HCMEC Pellet 人心臟微血管內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 纖維母細胞粘附檢測試劑盒Fibro
ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;NTERA-2
CM-H094人滑膜細胞*培養(yǎng)基100mL
LncaP, 人前列腺癌細胞 腹水瘤,SRS-82細胞 TOV-112D(人上皮性卵巢癌細胞)
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒 Human Angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA Kit
人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-Mi2-Ab ELISA Kit
RatLeptin,LEPELISA試劑盒大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangranulocytechemotacticprotein-2,GCP-2ELISA試劑盒人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLactoferrinantibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanB-CellLinkerProtein,BLNKELISA試劑盒人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物種子高質(zhì)純化葉綠體分離試劑盒10次
HumanT-cellspecificGTPase,TgtpELISAKit人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
堿性磷酸酶染色試劑盒4×20ml使用說明書人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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