堿性磷酸酶-PAS聯(lián)合染色液6X50ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
堿性磷酸酶-PAS聯(lián)合染色液6X50ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
堿性磷酸酶-PAS聯(lián)合染色液6X50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
J82(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E

CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人細胞裂解液 (陽性對照)

SFPAC-1細胞，人胰腺癌細胞 人舌癌細胞系,Tca8113-P60細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2

人腦膜細胞總RNAHMC tRNA

Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
人表皮黑色素細胞-深色素cDNAHEM-d cDNA

IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

Bel-7405細胞，人肝癌細胞 逆轉錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞,PA317細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21

L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Different. Medium, 間充質干細胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]

HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細胞

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細胞 Ha Fe(羊膜細胞)

急性T淋巴細胞白血病細胞;TALL-104

F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠早老素1(PS-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit

人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： anti-Q-Ab ELISA Kit

RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humangolgiprotein73,GP-73ELISA試劑盒人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLactateDehydrogenase，LDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒

HumanTroponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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