Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件： -20℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

鈣離子檢測(cè)試劑盒采用Fluo-3,AM細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針檢測(cè)鈣離子。Fluo-3,AM穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。但是，當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，熒光會(huì)增加60至100倍，大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)*使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)為525～530nm?？梢允褂脽晒怙@微鏡、酶標(biāo)儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
白屈菜 Chelidonium majus L. Sanguinarine 血根堿 2447-54-3 C20H14NO4+ ≥98%

高三尖杉酯減HomohcrringtoninqHPLC≥98%,20mg/支

茶減 Theophylline 58-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定鹽酸布替奈芬100681-200501常溫，避光100mg

Ibuprofen *標(biāo)準(zhǔn)品15687-27-1 750mg
160337-95-1 *標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 15mg

高麗槐速;馬卡因GaoLihuai;maackiain19908-48-6HPLC≥98%,20mg/支

LaMiide LAMIIDE 27856-54-8

噻嘧啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg噻嘧啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品

5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸 117570-53-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
黃連堿 Coptisine (≥98%,HPLC) 3486-66-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

余甘子Phyllanthus emblica 算盤(pán)子二醇 6610-56-6 C30H50O2 ≥97.5% 胡黃連苦甙 I168195

Sesamin芝麻素607-80-720mg/支

Oxymetxolone CIII羥甲稀龍標(biāo)準(zhǔn)品434-07-1 200mg

長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine 長(zhǎng)春質(zhì)堿 2468-21-5 C21H24N2O2 ≥98%
莧菜紅1克保存：-20℃

阿脲;中草酸二酰脲;四氧嘧啶;二酰脲;1,3-二氮四羰六環(huán);2-氧代丙二酰脲;二氮-(1,3)六環(huán)四酮Alloxan;2,4,5,6-(1H,3H)PyriMi-dinetetrone;2,4,5,6-Tetraoxohexaxy7nopyriMidine;Mesoxalylurea;MesoxalylcarbaMide

4-甲基本酚，英文名或英文縮寫(xiě)：p-Cresol，級(jí)別：BR，54-56℃，規(guī)格：500克

甲硫醇鈉鹽 Sodium thiomethoxide,95% 5188-7-8 1G 通用試劑

L-天門(mén)冬安醋-β-芐酯(-20`C) L-cspcrtic ccid 4-bqnzyl qstqr 177-63-1
-4-磺酸shēng huà shì jì容量：1公斤

1433-27-81-叔丁基-4-本1-TERT-BUTYL-3-etxylCARBODIIMIDE

轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母)shēng huà shì jì容量：25克

苯銨 Ammonium benzoate,≥99.7% 1863-63-4 500G 通用試劑

錳 Manganese II sulfate monohydrate (≥98... 10034-96-5 500G 通用試劑
Ca2+鈣離子染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法*/鹽酸*/鹽酸*/鹽酸柔*/阿得里亞霉素/14-羥正定霉素/DOX USP級(jí)，98% 25、100、500毫克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

RIBOZOLRNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑生物技術(shù)級(jí)粉色至暗粉色透明液體RTsigma

聚(4-烯) POLY(4-VINYLPYRIDINq) 23-41-1

依來(lái)鉻藍(lán)R/藍(lán)光酸性鉻花青/羊毛鉻菁/媒介藍(lán)3/羊毛鉻花青R/3,3-(3H-2,1-苯并惡噻-3-亞基)雙(6-羥基-5-) S,S-二氧化物三鈉鹽/鉻花青R

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