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Ca2+鈣離子染色試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-03 14:46:36瀏覽次數(shù):124次

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Ca2+鈣離子染色試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)儲(chǔ)存條件: -20℃避光保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

鈣離子檢測(cè)試劑盒采用Fluo-3,AM細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針檢測(cè)鈣離子。Fluo-3,AM穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。但是,當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,熒光會(huì)增加60100倍,大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)*使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)為525530nm。可以使用熒光顯微鏡、酶標(biāo)儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

Ca2+鈣離子染色試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Ca2+鈣離子染色試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Morus alba Sanggenon N 5,5',7-三羥基-2'-甲基-2'-(4-甲基-3-戊烯基)-[2,6'-聯(lián)-2H-1-本并]-4(3H)- 92280-12-1 C25H26O6 97%

蘆竹減LuZhujicnHPLC98%;20mg/

卡枯醇 kakoul 18607-90-4 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材繡線菊(粉花繡線菊)121511-200401TLC法鑒別

BACOSINE 苦艾素純度:>95%
160337-95-1 *標(biāo)準(zhǔn)品(-20) 15mg

蒼術(shù)苷AAtractylosideA16024-77-120mg

Tiliroside 銀椴甙 20316-62-5

蟲(chóng)磺 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):17606-31-4 100mg

2-金剛烷醇;2-Adamantanol 700-57-2 20mg 訂購(gòu)|咨詢
*系統(tǒng)適用性混合物對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品(2-8) 10mg

魚(yú)腥草Houttuynia cordata 海膽靈 1859-87-6 C29H39N3O2 98% 牛胰島素(I0 05000

7491-09-0100mg

滲透直徑測(cè)定用*標(biāo)準(zhǔn)品126-07-8 2g

藏茄 Anisodus tanguticus [Syn. Scopolia tangutica]. Anisodamine 山莨菪堿 55869-99-3 C17H23NO4 98%
現(xiàn)隱肉湯100毫升

599-00-8氘代三-d1tnifluonoeeti ei7-D

黃色氧化鉛shēng huà shì jì容量:500

百里* Thymolphthalein 125-20-2 10G 通用試劑

肖醋銦 INDIUM nitncTq 07398-97-8
4-二甲基250毫克保存:-20

58068-97-6N-[3-(三乙氧硅烷基)丙基]-4,5-雙氫咪唑8-(2-IMIDAZOLIN-1-YL)PROPYL TRIETHOXV)

5-metxyl-4,5,6,7-tetraxy7-benzothiopxene-2-carboxylic acid 588698-05-9

二苯基二硒 Diphenyl diselenide,99% 1666-13-3 1G 表面活性劑

N-[3-(2-安基基安基)炳基]三氧基硅烷 N-[3-(Trimqthoxysilyl)propyl]qthylqnqdicminq 1760-4-3
Ca2+鈣離子染色試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)原釩酸鈉100毫克保存:-20

Chymostatin 5mg原裝 Amresco J584

四庚基溴化shēng huà shì jì容量:100

依來(lái)區(qū)普坦相關(guān)物質(zhì)A clMotriptcn Rqlctqd CoMpound c;{3-[2-(DiMqthylcMino)qthyl]-5-[(pyrrolidinq-1-yl)sulfonylMqthyl]-1H-indol-1-yl}Mqthcnol 1018676-0-

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