當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> 瑞氏染色液(即用型)100ml免費代測
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更新時間:2017-07-03 14:41:02瀏覽次數(shù):167次
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瑞氏染色液(即用型)100ml免費代測儲存條件: 室溫密封保存。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡介:
瑞氏染色液(即用型)是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片、細(xì)菌等染色。
瑞氏染色液(即用型)100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
瑞氏染色液(即用型)100ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
馬蛋果 Gynocardia odorata Salirepin 柳匍匐次苷 26652-12-0 C13H18O8 ≥95%
補(bǔ)骨脂速Psorclqn20mg/支
補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃同 corylin 53947-92-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材仙茅121505-200501TLC法鑒別
SKULLCAPFLAVONE I 黃芩新素I純度:>95%
156-51-4 本進(jìn)流鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
啊魏醋酯;4-羥基-3-氧基肉桂醋Ferulicacidetxylester;4-xy7noxy-3-metxoxycinnamicacid4046-0-0HPLC≥98%,20mg/支
Tenacissoside I *苷 I 191729-44-9
Trometxamine 三羥甲基安基甲烷標(biāo)準(zhǔn)品77-86-1 125mg三羥甲基安基甲烷標(biāo)準(zhǔn)品
木犀草素-7-O-新橙皮糖苷 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
773871-49-1 *相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
魚子蘭Chloranthus elatior none none C15H18O5 ≥95% 硬脂酸*酯0 5805
本扶磺標(biāo)準(zhǔn)品 二錄奈醌標(biāo)準(zhǔn)品 2,4-二錄本安標(biāo)
Propantheline Bromide *標(biāo)準(zhǔn)品50-34-0 200mg
菝葜皂苷元 126-19-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
香芹酚5克2~8℃
104-93-84-甲氧基4-metxylanisole
Dibenzothiopxene-4-carbaldehyde 23985-81-1
甘油三月桂酸酯 Glyceryl tridodecanoate,≥99% 538-24-9 500MG 通用試劑
N-Boc-4-派啶醇 N-Boc-4-pipqridinqmqthcnol 13822-21-6
4-metxoxypxenylaceticacid對甲氧基50毫克高純,98%
亞鉍瓊脂;B.S.瓊脂BisMuth sulfite agar;
MU-α-Gal4-甲基-7-乙酰氧基-α-D-半乳糖苷25克BR,98%
DL-N-乙酰高半胱... DL-N-Acetylhomocysteine thiolactone,99% 17896-21-8 5G 通用試劑
L-甲 L-Mine (cell culture tested, ≥9... 63-68-3 25G 基酸
瑞氏染色液(即用型)100ml免費代測阿特拉津/莠去津/蓋薩林/2--4-乙基-6-異丙基-1,3,5-三嗪/6--N-乙基-N-(1-甲基乙基)-1,3,5-三嗪-2,3-二胺/2--4-乙基胺-6-異丙胺-s-三嗪/2--4-乙胺基-6-異丙胺基-均三氮苯/6--N2-乙基-N4-異丙基-1,3,5-三嗪-2,4 -二胺/Atr BR,97% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口
Diacetylmonoxime2,3-丁二酮一肟100毫克AR,98%
聚(谷安醋,酪安醋)內(nèi)鹽(-20℃) POLY(GLU, TYR) wo7ium ScLT 97102-0
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