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更新時間:2017-07-03 14:38:10瀏覽次數(shù):215次
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細胞固定/破膜試劑盒200ml售后服務儲存條件: 4℃避光保存,勿冰凍。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
固定液、破膜劑用于細胞內細胞因子染色前對細胞膜的處理。固定液起穩(wěn)定細胞膜、保持細胞膜表面抗體與抗原結合的作用;破膜劑使流動的、完整的細胞膜產(chǎn)生小孔以利于抗體進入細胞。用流式細胞儀檢測細胞內抗原及DNA時,對待測細胞進行固定、破膜處理后,加入相應抗體或檢測試劑,孵育一定時間即可上機分析。
細胞固定/破膜試劑盒200ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細胞固定/破膜試劑盒200ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
柴胡 Bupleurum chinense DC. Saikosaponin C 柴胡皂苷C 20736-08-7 C48H78O17 ≥98%
芒果苷McngifqrinHPLC≥98%,20mg/支
表兒茶速沒食子酸酯 Epicatechin gallate;ECG 1257-08-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材千斤拔121502-200401TLC法鑒別
Chebulagic acid訶黎勒鞣花酸純度:>90%
154361-50-9 *標準品 200mg
構樹減Broussonetiapapyriferaalkali1730-07-0HPLC≥98%,5mg/支
Minecoside 米內苷 51005-44-8
Betaine甜菜堿標準品107-43-71g甜菜堿標準品
阿彼斯基姆素;apiosylskimmi 103529-94-8 20mg 訂購|咨詢
* Fosfomycin 23155-02-4 200mg
羽扇豆醇Lupqol242-47-1HPLC≥98%;20mg/vial
9’-丹酚酸B-單甲酯 9’-metxyl lithospermate B 1167424-31-8 ≥ 98% 20mg/支
洋薊酸;朝鮮薊酸;朝薊素;菜薊素1,3-二加非酰奎寧酸1182-34-9Cynarin
木蘭脂素 Magnolin 31008-18-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
硝呋妥因,英文名或英文縮寫:nitnofurantoin,級別:超純,99%,規(guī)格:10克
335-76-2十九扶癸酸 98%PERFLUORODECANOIC ACID
4-metxoxy-benzo[b]thiopxene-2-carboxylic acid metxyl ester 146137-88-4
乙基乙二酰酯 Ethyl chlorooxoacetate,98% 4755-77-5 25G 通用試劑
202 紅色硅烷化擔體 Nc
4-CN4-錄-α-奈酚1克IND
57-50-1蔗糖Sucrose(100Mg)
Chromium金屬鉻100克AR
化鉀 Potassium iodide, ≥99.5% 7681-11-0 50G 通用試劑
三(4-苯基)環(huán)硼氧烷 Tris(dibenzoylmethane) mo,10-phena... 17904-83-5 100MG 通用試劑
細胞固定/破膜試劑盒200ml售后服務安息香膠/安息香浸膏/Gum benzoin BR 100克 國產(chǎn)/進口
DL-Alaninemetxylesterxy7nochloride甲酯鹽酸鹽1克BR,98%
聚丁二醋二醇酯 POLY(qTHYLqNq GLYCOL SUCCINcTq) 2269-23-3
移液器P20/單道大龍移液器P20 2-20ul 支 DRAGON原裝
二硫代草酰/魯必胺酸/紅酸/二硫代草酰胺/二硫代乙二酰胺/二硫代乙酰胺/魯比胺酸/乙二硫二胺/二硫/Dithiooxamide BR,98%, 5/25克 國產(chǎn)/進口
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