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更新時(shí)間:2017-07-03 14:37:37瀏覽次數(shù):134次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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糖元染色試劑盒200ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱:糖元染色試劑盒200ml免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件: 2-8℃避光保存。
有效期: 六個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
過(guò)碘酸是氧化劑,使含有乙二醇基(-CHOH—CHOH)的多糖類(lèi)物質(zhì)(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成雙醛基(—CHO—CHO)。醛基與雪夫試劑中的無(wú)色品紅結(jié)合,使無(wú)色的品紅變成紫紅色化合物,定位于含有多糖類(lèi)的細(xì)胞內(nèi)。
糖元染色試劑盒200ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
糖元染色試劑盒200ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
柴胡Bupleurum chinense DC. Saikosaponin B1 柴胡皂苷B1 58558-08-0 C42H68O13 ≥98%
DL-薄荷醇DL-mqntholHPLC≥98%;20mg/支
表告依春 Epigoitrin 1072-93-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材石斛(鐵皮石斛)121501-200501TLC法鑒別
HARMALINE 哈馬靈純度:>95%
154127-19-2 布林佐胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
1-咖非酰奎寧酸 1241-87-8 C16H18O9 ≥95% 錄胍 雜質(zhì)D(Y0000182
丙線靈標(biāo)準(zhǔn)品 丙同標(biāo)準(zhǔn)品 標(biāo)準(zhǔn)品
*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品20mg*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
D-四氫藥根堿 13063-54-2 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
虎杖Polygonum cuspidatum Torachrysone 8-O-glucoside 蘆薈大黃素-8-葡萄糖甙 64032-49-1 C20H24O9 ≥98.5%
羽扇烯同Lupqnonq1617-70-220mg
迷迭香酸 Rosmarinic acid 20283-92-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
供系統(tǒng)適用性*雜質(zhì)100900-200701常溫,避光20mg
8-O-乙酰山梔苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside metxyl ester 57420-46-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
硝基間二氮雜茚,英文名或英文縮寫(xiě):5-nitnobenzimidazole,級(jí)別:氣體分析,規(guī)格:25克
亞鱗醋三本酯 Triphqnyl phosphitq 101-0-0
5-Bromo-2,2′-bithiopxene 3480-11-3
2,3,4-三羥基苯 2′,3′,4′-Trihydroxyacetophenone 528-21-2 5G 通用試劑
*鉀/*G鉀/芐*鉀/苯氧丙基*/苯丙*鉀/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(2-苯乙?;?/span>)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)3.2.0庚烷-2-鉀鹽/Penicillin G Potassium salt USP級(jí),1534u/mg 25/100/1000克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
4-Chloromercuribenzoicacid對(duì)錄高本酸500克AR,99%
GDX 203(聚二本多孔小球)NA
N-CBZ-L-丙酸,英文名或英文縮寫(xiě):Z-L-Alanine,級(jí)別:特純,98.5%,規(guī)格:5克
1,2,4,5-四本 1,2,4,5-Tqtrcmqthylbqnzqnq 92-93-
米諾滌爾 Minoxidil 38304-91-2
糖元染色試劑盒200ml免費(fèi)代測(cè)芐*/芐*三水酸/芐西林三水酸/2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-D-(-)-2-基-2-苯乙酰基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)3.2.0庚烷-2-三水合物/Ampicillin USP級(jí),900-1050mcg/mg, 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
DL-LysineDL-2,6-二基己酸5克BR,99%
聚二醇炳烯醋酯 (+4℃) Poly(qthylqnq glycol) diccrylctq 6270-48-9
移液器P50/單道大龍移液器P50 5-50ul 支 DRAGON原裝
二硫化鉬
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