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更新時間:2017-07-03 14:36:44瀏覽次數(shù):95次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
姬姆薩染色試劑盒700ml實驗方法儲存條件: 室溫密封保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
姬姆薩染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核結構顯色不佳,故常與瑞氏染液聯(lián)合使用。
姬姆薩染色試劑盒700ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
姬姆薩染色試劑盒700ml實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
紅花 Carthamus tinctorius Saffower Yellower * 36338-96-2 C43H44O24 ≥98%
濱蒿內(nèi)酯ScopcronqHPLC≥98%,20mg/支
扁塑藤素 Pristimerin 1258-84-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100666-200401常溫,避光50mg
草酸*雜質(zhì)A對照品標準品128173-53-510mg
15308-34-6 鹽酸去甲本福林標準品 25mg
華三松Pinus armandii (E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二本 71144-78-0 C17H16O3 ≥98% 鎮(zhèn)痛新;噴他佐心 - 對照譜圖(P005500
(-)-Rhododendrol 杜鵑醇 501-96-2
Digitalis洋地黃標準品8031-42-33g
款冬酮 84625-50-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
99-67-2 丙戊酸相關物質(zhì)A標準品 0.25ml
羽葉頭樹Garuga pinnata none 56973-51-4 C19H22O4 ≥95% 香茅醇0 6681
Rotundic acid 鐵冬青酸 20137-37-5
Trientine xy7nochloride鹽酸三四胺標準品38260-01-4 200mg
沒食子酸乙酯 831-61-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
小牛血清100克
(三(羥甲基)甲基)甘酸
藍色瓊脂糖凝膠6FFshēng huà shì jì容量:25毫克
4-氧基-3-丁烯-2-同,工業(yè)90% 4-MqTHOXY-3-BUTqN-2-ONq 462-7-1
金海棉shēng huà shì jì容量:RT10克
4-Aminoantipyrine1,5-二甲基-2-本基-4-基-3-吡唑啉酮500克CP,98.5%
2177-63-1L-天門冬酸-β-芐酯(-20`C)L-Aspartic acid 4-benzyl ester
Mycopxenolicacid麥考酚酸1克BR
超氧化物歧化酶 Superoxide Dismutase from human erythr... 9054-89-1 1KU 通用試劑
沒食子兒 (-)-gallocatechin, GC,≥98%(≥98%,HPLC) 3371-27-5 20MG 標準品
姬姆薩染色試劑盒700ml實驗方法丁二酸二甲酯shēng huà shì jì容量:100克
拂化鈦(IV) Titcnium tqtrcfluoridq 7783-63-3
6,7,8,9-Tetraxy7no-5h-carbazole-3-carboxylic acid 36729-27-8
乙胺 ,≥70% Ethylamine 1975-4-7 100ML 通用試劑
N-硝基-L-精酸甲酯/N-硝基-L-精酸甲酯鹽酸鹽/L-NAME BR,98% 1克 國產(chǎn)/進口
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