我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

大鼠卵巢成纖維細(xì)胞【Rat Ovary: Normal Ovarian Firbroblasts】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)大鼠前列腺素E2合成酶(PGES)試劑盒 Rat prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit 替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)  telbivudine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠前列腺素E代謝物(PGEM)試劑盒 Rat Prostaglandin E Metabolite,PGEM ELISA Kit 輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷   Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane  質(zhì)量規(guī)格：含量≥99%（GC）

大鼠前列腺素F(PGF)ELISA檢測(cè)試劑盒ratProstaglandinF,PG-F 96T/48T 雷替曲塞  Raltitrexed  質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大鼠前列腺素F(PGF)試劑盒 Rat Prostaglandin F,PGF ELISA Kit L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽  L-Ornithine L-aspartate salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProstaglandinF2α,PGF2α 96T/48T 雙嘧達(dá)莫  Dipyridamole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

大鼠前列腺素F2α(PGF2α)試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit 他米巴羅汀  Tamibarotene  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%

大鼠前列腺素F2α受體(PTGFR)試劑盒 Rat Prostaglandin F2-alpha receptor,PTGFR ELISA kit 文多靈  Vindoline  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)試劑盒 Rat prostaglandin F syhase,PGFS ELISA Kit 羅丹明B；玫瑰紅B  Rhodamine B  質(zhì)量規(guī)格：BS

大鼠前列腺素H2(PGH2)試劑盒 Rat Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit 頭孢哌酮;頭孢哌酮酸  Cefoperazone Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProstaticAcidPhosphatase,PAP 96T/48T 頭孢哌酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cefoperazone Acid  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
動(dòng)物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 吉莫斯特;吉美嘧啶  Gimeracil  質(zhì)量規(guī)格：>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑

人高香草酸(HVA)ELISA試劑盒人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Daurinoline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGES2 ELISA Kit 氯化木蘭花堿  Magnoflorine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGuanineExchangeFactor,GEFELISAKit 96T/48T 木蘭花堿  Magnoflorine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 Rat lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit 化木蘭花堿  Magnoflorine iodide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱HumanCICPELISAKit人I型腺原蛋白C末端前肽(CICP)規(guī)格：96T/48T 去甲烏藥堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)  Higenamine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

動(dòng)物組織氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 去甲烏藥堿鹽酸鹽  Higenamine   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二氫歐山芹素 (標(biāo)準(zhǔn)品)  Columbianetin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠前列腺素E2合成酶(PGES)ELISA試劑盒 ，英文名： PGES ELISA Kit 異澤蘭黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Eupatilin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 96T/48T 利莫那班羧酸  Rimonabant carboxylic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞說明大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)試劑盒 Rat Peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA Kit 羅布麻寧；夾竹桃麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Acetovanillone  質(zhì)量規(guī)格：GC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 羅布麻寧；夾竹桃麻素  Acetovanillone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸  Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid  質(zhì)量規(guī)格：>95%

大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit 輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷   Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane  質(zhì)量規(guī)格：含量≥99%（GC）

大鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)試劑盒 Rat oxidizided glathione,GSSG ELISA Kit 輪環(huán)藤寧 HPLC≥98% 20mg

大鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgG)試劑盒 Rat keyhole limpet hemocyanin(KLH)aibody(IgG)ELISA kit 輪環(huán)藤堿 HPLC≥98% 20mg

大鼠葉酸(FA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFolicacid,FAELISAKit 96T/48T 卵清蛋白；雞蛋白蛋白  Ovalbumin/Egg albumins  質(zhì)量規(guī)格：BR,80~90%

大鼠葉酸(FA)試劑盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit 路路通酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Liquidambaric acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA檢測(cè)試劑盒RatypsinELISAKit 96T/48T 路路通酸 HPLC≥98% 20mg

大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit 路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Liquidambaric lactone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。