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我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠表皮黑色素細(xì)胞價格 | T25m2 | CS-963930 |
大鼠表皮黑色素細(xì)胞【Rat Skin: Normal Melanocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAP 96T/48T Z-Ala-Ala-Leu-pNA Z-Ala-Ala-Leu-pNA 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 ,英文名: PAP ELISA Kit 三亞碳酸酯 TMC 質(zhì)量規(guī)格: 度≥99%
小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit 碳酸錳(>98%,BR) Manganese (II) carbonate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 二氫錳(>98%,BR) Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor,PAI 96T/48T 松三糖單水;D-(+)-松三糖一水 Melezitose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1 96T/48T 縮節(jié)胺(植物激素級) Mepiquat chloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,植物激素級
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI1 ELISA Kit 偏(>38%(HPO3),BR) Metaphosphoric acid 質(zhì)量規(guī)格:>38%(HPO3),BR
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit 肉桂酸甲酯(>98%,BR) Methyl cinnamate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI2 ELISA Kit 二氫酮酸甲酯(植物激素級) Methyl dihydrojasmonate 質(zhì)量規(guī)格:>90%,植物激素級
小鼠纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒 ,英文名: TAFI ELISA Kit 吲哚-4-羧酸甲酯(>98%,BR) Methyl indole-4-carboxylate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
COLLAGENI蛋白共沉淀分析試劑盒5 醋酸鎂四水(分子生物學(xué)級) Magnesium acetate, tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙?;?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 二氫鈉一水(ACS級) phosphate, monobasic, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:ACS級,>98.5%
小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)ELISA試劑盒 ,英文名: F8aLC ELISA Kit 葡萄糖酸鈣 Calcium gluconate, hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測試劑盒Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T 十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?;溠刻擒?/span> N-Dodecyl-b-maltoside 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 Human LRP ELISA Kit 鹽酸氨基脲 Aminourea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸鏈霉素滅菌溶液,30 mg/ml Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格:Sterile滅菌溶液,30mg/ml
Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20 乙酰胺 Acetamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%
MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 萘乙酰胺(AR) 1-Naphthylacetamide 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
小鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ,英文名: FⅫ ELISA Kit 鐵屑(>98%,BC) Iron granules 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA檢測試劑盒Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 96T/48T 檸檬酸鐵(>98%,BR) Iron(III) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠表皮黑色素細(xì)胞價格動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20 三戊酯(>98.0%(GC)) Triamyl Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
動物腦組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀三水(>98%,BC) Potassium phosphate, tribasic trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
動物內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鉀 Potassium phosphate, tribasic 質(zhì)量規(guī)格:>98%
動物皮膚組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Trimethyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
動物脾臟組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三鈣(>98%,BR) Calcium phosphate, tribasic 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物前列腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
動物全血高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10 三丁酯(standard for GC,>99.5%) Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,>99.5%
動物全血活性線粒體分離試劑盒10 三丁酯(CP) Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:CP
動物全血線粒體粗提分離試劑盒10 三丁酯(AR,99%) Tributyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:AR,99%
動物全組織糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒10 三苯酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Triphenyl phosphate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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