當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2大鼠輸尿管上皮細胞說明
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠輸尿管上皮細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963899 |
大鼠輸尿管上皮細胞【Rat Ureter:Normal Ureter Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
NAP人中性粒細胞堿性0酸酶規(guī)格:48T/96T 羅漢果苷III HPLC≥98% 20mg
NA人神經(jīng)氨酸酶規(guī)格:48T/96T 羅漢果苷IV HPLC≥98% 20mg
NCAM-L1/CD171人神經(jīng)細胞粘附分子配體1規(guī)格:48T/96T 羅漢果苷VI HPLC≥98% 20mg
NE-B人重去甲規(guī)格:48T/96T 羅漢果黃素 HPLC≥98% 10mg
nephrin人蛋白規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷ⅡA HPLC≥98% 10mg
NE人中性粒細胞彈性蛋白酶規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷ⅢA HPLC≥98% 10mg
NF人神經(jīng)絲蛋白規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷IIIe HPLC≥98% 10mg
NF人神經(jīng)絲蛋白規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷IVa HPLC≥98% 10mg
NGAL人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷Ive HPLC≥98% 20mg
NKB人神經(jīng)激肽B規(guī)格:48T/96T 羅漢果皂苷V HPLC≥98% 20mg
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 柚皮苷二氫查爾酮 Naringin dihydrochalcone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 潮霉素B(羅氏原裝) Hygromycin B 質(zhì)量規(guī)格:羅氏原裝,濃度50mg/ml
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 芹菜苷; 芹黃苷 Apiin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
guineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA試劑盒豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷 Chrysoeriol 7-O-glucoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品
真菌/酵母細胞內(nèi)氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標準品) Kaempferol-3-O-rutinoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
MouseBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 泮托拉唑鈉一水物 Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA試劑盒 ,英文名: PAP ELISA Kit 泮托拉唑鈉(標準品) Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,一水物
小鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Mousesolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T 鹽酸法舒地爾 Fasudil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人副性天皰瘡(PNP)抗體試劑盒 Human PNP aibody ELISA kit 鹽酸法舒地爾(標準品) Fasudil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
RatIerleukin23,IL-23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 草質(zhì)素苷(標準品) Rhodionin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
大鼠輸尿管上皮細胞說明大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit 羅哌卡因 Ropivacaine base 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T 羅庫銨 Rocuronium Bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,EP6.0
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 羅紅霉素(標準品) Roxithromycin 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
大鼠血清(NO)ELISA檢測試劑盒Ratniicoxide,NOELISAKit 96T/48T 羅紅霉素 HPLC≥98% 200mg
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒RatSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T 羅紅霉素 Roxithromycin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 羅漢松樹脂酚'Oβ龍膽二糖苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit 羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品) Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit 羅漢松樹脂酚 HPLC≥98% 20mg
大鼠血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒Rat50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T 羅漢松黃酮 A. HPLC≥98% 5mg
大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T 羅漢果皂苷V(標準品) Mogroside Ⅴ 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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