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收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
大鼠尿道上皮細【Rat Urinary Tract :Normal Urinary Tract Epithelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠尿道上皮細價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963898 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
小鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)ELISA試劑盒 ,英文名: FOXP3 ELISA Kit 三基十四烷基氯化膦 Tributyltetradecylphosphonium chloride 質量規(guī)格:50%grade
小鼠腸型脂肪酸結合蛋白(FABP2)ELISA試劑盒 ,英文名: FABP2 ELISA Kit 羅漢果皂苷ⅢA1 mogroside ⅢA1 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA檢測試劑盒Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABP 96T/48T 羅漢果皂苷ⅡA2 mogroside II A2 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 ,英文名: iFABP ELISA Kit 羅漢果皂苷Ⅲe mogroside III e 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 羅漢果黃素 Grosvenorine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP 96T/48T 白皮杉醇,3'-羥基白藜蘆醇;比杉特醇(標準品) Piceatannol 質量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 ,英文名: hs-CRP ELISA Kit 氯化鎂 Magnesium chloride 質量規(guī)格:工業(yè)級
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA檢測試劑盒MouseSuperOxidaseDimase,SOD 96T/48T 苜蓿素(標準品) Tricin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 ,英文名: SOD ELISA Kit 人參皂苷Rg5 GinsenosideRg5 質量規(guī)格:HPLC≥95%,對照品
小鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SOD1 ELISA Kit 兒茶素沒食子酯酸 CG 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠脂多糖/內(LPS)試劑盒 Rat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit 白花前胡甲素(標準品) Praeruptorin A 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
英文名稱HumanOsteopoin,OPNELISAKIT人OPN規(guī)格:96T/48T 反式玉米素 trans-Zeatin 質量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
動物組織/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 氯亞鉑酸鉀 Dipotassium tetrachloroplatinate 質量規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度>99.95%
Wheatgermagglinin,WGAELISA試劑盒麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 ,英文名: PSA ELISA Kit 馬兜鈴酸A Aristolochic acid A 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulin,IgAELISAKit 96T/48T 羥基茜草素/紅紫素(標準品) Purpurin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)試劑盒 Human Cyr61/CCN1 ELISA Kit 酸棗仁皂苷D(標準品) Jujuboside D 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatIerleukin21,IL-21ELISAKit大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 偽原薯蕷皂苷 Pseduoprotodioscin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PASE-9蛋白共沉淀分析試劑盒5 氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品) Oxypaeoniflorin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISA試劑盒7規(guī)格:96T/48T 3-異倒捻子素 3-isomangostin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠尿道上皮細價格大鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒 Rat bradykinin,BK ELISA Kit 羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀 Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine 質量規(guī)格:≥97%,BR
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA檢測試劑盒RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T 羅通定 HPLC≥98% 20mg
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Rat von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 羅替戈汀 Rotigotine 質量規(guī)格:>95%,BR
大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)試劑盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit 羅舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷酸 Rosuvastatin Acyl-β-D-glucuronide 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅蛋白(Hb)試劑盒 Rat Hemoglobin,Hb ELISA Kit 羅舒伐他汀內酯 Rosuvastatin Lactone 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅蛋白(HbCO)試劑盒 Rat Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit 羅沙替丁 Roxatidine 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅素結合蛋白(HPX)試劑盒 Rat hemopexin,HPX ELISA Kit 羅匹尼羅N-氧化物 Ropinirole N-Oxide 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 96T/48T 羅哌卡因鹽酸鹽-d7 Ropivacaine-d7 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒 Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit 羅哌卡因-d7 Ropivacaine-d7 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T 羅哌卡因(標準品) Ropivacaine base 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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